Die Züchtung von menschlichem Krebsgewebe in der Gewebekultur und seine Sensibilitätstestung gegen neuere Zytostatika ^*

Zusammenfassung

Das Verfahren der Gewebezucht wurde am benignen und malignen Epithel des weiblichen Genitale geprüft. Zur Anwendung kam die Trypsinierungsmethode im Röhrchentest nach Dulbecco und Vogt. An 350 verschiedenen Gewebsentnahmen wurde in der Kultur eine Angehrate von 76% erreicht, ein Resultat, das insbesondere der Verwendung eines neuen Nährmediums zu verdanken ist. Mit Erfolg wurde normales Plattenepithel der Portio uteri explantiert. Ferner wurden Gewebe von „Carcinoma in situ” und infiltrierenden Kollumkarzinomen kultiviert, wobei sich keine Unterschiede hinsichtlich der Angehrate, der Wachstumsgeschwindigkeit sowie besonderer pathologischer Zellformationen ergaben. Insbesondere wurde das Phänomen der „nackten Zellkerne” als Ausdruck echter karzinomatöser Umwandlung (nach v. Albertini) bei beiden Läsionen gefunden. Außer der Kultivierung von Korpus- und Ovarialkarzinomen gelang eine solche von menschlichem Ovarialkarzinom-Aszites. Das Gewebezuchtverfahren gestattet die Züchtung jedes Tumormaterials und seine Testung gegenüber Zytostatika. Damit kann für jede Tumorträgerin die individuelle Ermittlung der wirksamsten zytostatischen Substanz in vitro in gewichtsadäquater Konzentration erfolgen. Für bestimmte Präparate wurden an verschiedenen Tumoren primäre und sekundäre Resistenzen ermittelt. Die Methode der Erprobung der Chemotherapie an menschlichen Primärkulturen in vitro erscheint für den Kliniker aufschlußreicher als das bisher übliche Verfahren der Testung an permanenten Zellstämmen, Tiertumoren oder Fibroblasten.

Summary

Normal and carcinomatous epithelium from female genitalia were grown on tissue culture. The trypsinization method in the test-tube test after Dulbecco and Vogt was used. Of 350 tissues 76% were cultured successfully, a high yield due largely to the use of a new type of nutrient medium. Normal squamous epithelium of the cervix could also be cultured, as were tissues of “carcinoma in situ” and infiltrating carcinoma of the cervix. There was no difference in the yield, the rate of growth and the appearance of abnormal cell formations between these different types of tissues. In particular, the so-called “naked cell nucleus” as an alleged expression of true carcinomatous transformation was found in both types of lesions. In addition to growing carcinomatous tissue from the uterus and the ovaries, tissue from cases of ovarian carcinoma with ascites were also cultured. — The method of tissue culture of cancer cells makes it possible to test their sensitivity to various cytostatic agents. The substance most effective in a given case and its optimal concentration can thus be estimated. For certain preparations, primary and secondary resistance of various tumours could be determined. This method of testing chemotherapeutic effectiveness on human primary cultures in vitro is probably more useful clinically than the previously employed method using permanent cell strains, animal tumours or fibroblast colonies.

Resumen

El cultivo de tejido canceroso humano en el cultivo tisular y su test de sensibilidad respecto de citostáticos más recientes

El procedimiento del cultivo tisular fué examinado en el epitelio benigno y maligno de los genitales femeninos. Se aplicó el método de tripsinación en el test de tubito según Dulbecco y Vogt. En 350 tomas de tejido diferentes se alcanzó en el cultivo una cuota de prendimiento de 76%, un resultado que se debe especialmente al empleo de un nuevo medio nutritivo. Se explantó con éxito epitelio plano normal de la “portio uteri”. Se cultivaron además tejidos de “carcinoma in situ” y carcinomas infiltrantes del cuello uterino, no resultando diferencias respecto de la cuota de prendimiento, velocidad de crecimiento así como de formaciones celulares patológicas especiales. Fué hallado especialmente el fenómeno de los “núcleos celulares desnudos” como expresión de una transformación carcinomatosa auténtica (según v. Albertini) en ambas lesiones. Además del cultivo de carcinomas del cuerpo uterino y ováricos se logró el de ascitis de carcinoma ovárico humana. El procedimiento de cultivo tisular permite el cultivo de cualquier material tumoral y su test respecto de los citostáticos. Con ello puede practicarse para cada portadora de tumores la averiguación individual de la substancia citostática más eficaz in vitro, en concentración adecuada al peso. Para preparados determinados se averiguaron en diferentes tumores resistencias primarias y secundarias. El método comprobatorio de la quimioterapia en cultivos primarios humanos in vitro aparece para el clínico más instructivo que el procedimiento hasta ahora usual del test en cepas celulares permanentes, tumores animales o fibroblastos.