Zur Problematik des Coombs-Tests unter besonderer Berücksichtigung eines eigenen Verfahrens

Zusammenfassung

Zum Nachweis der „inkompletten” Antikörper dienen völlig heterologe Substanzen verschiedenster Provenienz als sogenannte Supplemente. Zumindest für einen Teil dieser Substituenten darf angenommen werden, daß unspezifische Eingriffe an der Blutkörperchenoberfläche stattfinden. Das interessanteste Verfahren zum Nachweis von mit Antikörpern beladenen Blutzellen ist der Coombs-Test, der darauf beruht, daß auf Blutzellen angelagerte Antikörper entsprechend ihrer Gamma-Globulinnatur durch ein Anti-Mensch-Globulinserum angezeigt werden, wobei die wirksame Fraktion durch die Anti-Gamma-Globulinfraktion dies Antikörpers dargestellt werden soll. Eigene und fremde Erfahrungen legen jedoch den Verdacht nahe, daß für die Entstehung der Reaktion beim Coombs-Test neben spezifischen Mechanismen auch unspezifische Komplettierungsmechanismen, ähnlich denen der Agglutiniationsverfahren, eine Rolle spielen. Das wirksame Agens, das hier präzipitiert wird, wird offenbar nicht durch das Antikörperprotein, sondern durch das vom Antikörper auf die Blutkörperchenober-fläche geschleppte Komplementprotein repräsentiert. Es konnte gezeigt werden, daß nach Zusatz hypotoner NaCl-Lösungen zu sensibilisierten, gewaschenen Blutzellen eine Schollenbildung, in den negativen Kontrollen aber nur eine Hämolyse auftritt. Es wird angenommen, daß unter dem Einfluß der im hypotonischen Milieu erfolgenden Erythrozytenquellung die in der Tiefe sitzenden und für die inkompletten Antikörper „zu tief” gelagerten Rezeptororte an die Oberfläche gelangen und damit eine Agglutination begünstigen. Im Zusammenhang damit wird die unterschiedliche Wirkung der die Antigen-Antikörperreaktion fördernden Supplemente durch eine Änderung der Oberflächenladungen in dem Sinne erklärt, daß die Repulsivkräfte unwirksam werden und die klein-molekularen Antikörperfraktionen ein Netzwerk zur Agglutination aufrichten können.

Summary

Personal work and that of others is cited in support of the notion that in addition to specific mechanisms certain non-specific completion mechanisms, similar to agglutination processes, are involved in the reactions of Coombs test. The effective agent which is precipitated is apparently represented not by the antibody protein but by the complement protein which has been transferred from the antibody to the surface of the blood corpuscle. It has been shown that after the addition of hypotonic saline to sensitized washed red-blood corpuscles there occurs agglutination, but in the negative controls only haemolysis. It is assumed that the erythrocyte swelling as a result of the addition of hypotonic saline causes the deep-seated receptor-sites (which lie too far below the surface to be reached by the incomplete antibodies) come nearer the surface and thus facilitate agglutination. Similarly, the differential effect of the supplements which promote antigen-antibody reaction is explained on the basis of a change of surface charges so that the repelling forces are made ineffective and the small-molecular antibody fractions form a network for agglutination.

Resumen

Carácter problemático del test de Coombs, atendiendo principalmente a una técnica propia

Para demostrar la existencia de anticuerpos «incompletos» sirven sustancias completamente heterólogas, de los más diversos orígenes, llamadas suplementos. Se puede admitir que, por lo menos en una parte de estos sustituyentes, se presentan ingerencias inespecíficas en la superficie del glóbulo sanguíneo. La técnica más interesante para demostrar el glóbulo sanguíneo cargado de anticuerpos, es el test de Coombs, basado en que los anticuerpos depositados en la célula sanguínea, por su naturaleza gamma-globulínica, son señalados por un suero globulínico anti-humano, por la que la fracción activa debe estar representada por la fracción anti-gamma-globulínica del anticuerpo. Las experiencias propias y ajenas dejan entrever la sospecha de que para la formación de la reacción del test de Coombs, jueguen también un papel, junto a mecanismos específicos, mecanismos complementarios inespecíficos parecidos a los del procedimiento de la aglutinación. El agente eficáz, aquí precipitado, no se manifiesta por la proteina del anticuerpo, sino que está representado por la proteina complementaria, transportada por el anticuerpo a la superficie del glóbulo sanguíneo. Puede señalarse que, después de adicionar soluciones hipotónicas de ClNa a células sanguíneas sensibilizadas y lavadas, se presenta una formación grumosa, pero en los controles negativos, sólo aparece una hemolisis. Se supone que por la hinchazón de los eritrocitos, producida en el medio hipotónico, el sitio de implantación de los receptores, situado en el fondo y «muy profundo» para los anticuerpos incompletos, llega a la superficie y favorece con esto la aglutinación. Por ello se aclara el diferente comportamiento del suplemento, promotor de la reacción antígeno-anticuerpo, merced a una variación de las cargas superficiales, en el sentido de que las fuerzas contrarias se hacen inactivas y de que las fracciones moleculares pequeñas de los anticuerpos puedan establecer una malla para la aglutinación.