Senologie - Zeitschrift für Mammadiagnostik und -therapie 2010; 7 - A95
DOI: 10.1055/s-0030-1262067

Evaluierung neuer DNA Methylierungsmarker für die Früherkennung von Brustkrebs aus Blutserum

V Kloten 1, J Veeck 2, U Heindrichs 3, DO Bauerschlag 3, R Knüchel 1, E Dahl 1
  • 1Medizinische Fakultät der RWTH Aachen, Institut für Pathologie, Aachen, Deutschland
  • 2Abteilung für Medizinische Onkologie, Institut für Pathologie, Maastricht, Holland
  • 3Universitätsklinikum Aachen, Klinik für Gynäkologie und Geburtshilfe, Aachen, Deutschland

Zielsetzung: Jüngste Studien zeigen, dass die Detektion methylierter Tumor-DNA aus Blutserum für die Früherkennung von Tumoren erfolgreicher sein könnte als die Anwendung von Serum Proteinmarkern, da DNA-Methylierungsmarker eine hohe klinische Sensitivität und Spezifität aufweisen. In diesem Projekt haben wir erstmalig die Methylierungsfrequenzen von drei putativen Methylierungsmarkern (ITIH5, DKK3, WIF1) im Blutserum von Mammakarzinom Patientinnen untersucht. Es ist unser langfristiges Ziel ein Methylierungsmarker Genpanel zu etablieren, welches eine frühe und eindeutige Detektion von Brustkrebs aus Blutserum ermöglicht.

Methoden: 130 Serumproben von Patientinnen mit histologisch gesichertem Brustkrebs wurden analysiert. 10 Serumproben von gesunden Frauen, sowie 10 Serumproben von Frauen mit einer benignen Erkrankung der Brust dienten als Kontrollen. Die zirkulierende Tumor-DNA wurde mit dem Serum Kit der Firma Zymo Research aus 1ml Serum isoliert. Der Methylierungsstatus der Kanditatengene wurde mittels der methylierungsspezifischen PCR (MSP) bestimmt.

Ergebnisse: Eine Hypermethylierung der Kanditatengene konnte in der Tumor-DNA des Blutserums mit den folgenden Methylierungsfrequenzen gezeigt werden: DKK3: 38% (48/130); WIF1: 40% (51/130); ITIH5: 25% (32/130). Methylierungen der untersuchten Tumor-DNA im Serum zeigte sich bei kleinen Tumoren (pT1), bei einem negativen Lymphknotenstatus (pN0) und interessanterweise sogar in zwei DCIS Fällen. Die analysierten Kontrollen zeigten keine Methylierungen. Eine Kombination der putativen Tumorsupressorgene erhöhte die Detektion einer Methylierung im Blutserum auf 58% der untersuchten Brustkrebs-Fälle.

Zusammenfassung: Unsere Daten zeigen, dass tumorspezifische methylierte DNA von putativen Tumorsupressorgenen bei Mammakarzinom Patientinnen detektiert werden kann. Unser Ziel der zweiten Projektphase ist es, ein spezifisches Methylierungsmarker Panel zu etablieren, mit dem >9 0% der Brusttumore im Blutserum detektiert werden können.