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DOI: 10.1055/s-0031-1297012
A New Method Using Flow Cytometry to Measure the Effects of Drugs on Gastric Emptying and Gastrointestinal Transit in Mice
Publikationsverlauf
Publikationsdatum:
25. Dezember 2011 (online)
Summary
The use of radiolabelled markers is considered to be a gold standard for assessing gastric emptying and gastrointestinal transit in mice and rats, but their use has increasingly been restricted due to health concern. Therefore, a new method using fluorescent polystyrene microbeads and flow cytometry was devised. Saline containing fluorescent markers (together with non-fluorescent microbeads) was infused into the stomach of each mouse and gastric emptying and gastrointestinal transit were calculated by measuring the quantity of the fluorescent microbeads in the gastrointestinal tract using flow cytometer. The effects of saline (as a control), morphine (CAS 52-26-6) and dexmedetomidine (CAS 113775-47-6) were tested. Both gastric emptying and gastrointestinal transit measured with this method (after i.p. injection of saline) were similar to those reported previously using the conventional radiolabelled methods. Morphine significantly inhibited both gastric emptying and gastrointestinal transit in a dose-dependent manner. Dexmedetomidine did not significantly inhibit gastric emptying but inhibited gastrointestinal transit. These results were also similar to those obtained using the conventional radio-labelled method. The method using fluorescent microbeads and flow cytometry may be a reliable alternative to the methods using radioisotope for studying the effects of drugs on gastric emptying and gastrointestinal transit.
Zusammenfassung
Eine neue flußzytometrische Methode zur Messung der Wirkungen von Arzneistoffen auf die Magenentleerung und die Magen-Darm-Passage bei Mäusen
Die Verwendung radoaktiver Marker gilt als Goldstandard für die Bewertung der Magenentleerung und der Magen-Darm-Passage bei Mäusen und Ratten. Allerdings werden sie aus gesundheitlichen Gründen immer weniger eingesetzt. Deshalb wurde eine neue flußzytometrische Methode auf der Basis fluoreszierender Polystyren-Mikrokügelchen entwickelt. Kochsalzlösung mit fluoreszierenden Markern wurde (zusammen mit nichtfluoreszierenden Mikrokügelchen) in den Magen der Mäuse infundiert, und die Magenentleerung und Magen-Darm-Passage wurden durch Quantifizierung der fluoreszierenden Mikrokügelchen im Magen-Darm-Trakt flußzytometrisch ermittelt. Es wurde die Wirkung von Kochsalzlösung (als Kontrolle), Morphin (CAS 52-26-6) und Dexmedetomidin (CAS 113775-47-6) untersucht. Sowohl die Magenentleerung als auch die Magen-Darm-Passage, die auf diese Weise (nach i.p. Injektion von Kochsalzlösung) ermittelt wurden, waren mit denen nach der herkömmlichen Methode mit radioaktiven Markern gemessenen identisch. Dexmedetomidin hemmte die Magenentleerung nicht signifikant, hemmte aber die Magen-Darm-Passage. Diese Ergebnisse entsprachen ebenfalls jenen der herkömmlichen Methode mit radioaktiven Markern. Die flußzytometrische Methode auf der Basis fluoreszierender Mikrokügelchen kann als verläßliche Alternative zu den Methoden mit Radioisotopen angesehen werden, um die Wirkung von Arzneistoffen auf die Magenentleerung und die Magen-Darm-Passage zu untersuchen.