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DOI: 10.1055/s-0031-1297070
Thermodynamic Characterization of the Binding Process of Sulindac to Human Serum Albumin
Publikationsverlauf
Publikationsdatum:
25. Dezember 2011 (online)
Summary
This study deals with the molecular basis of the binding of the anti-inflammatory drug sulindac (CAS 38194-50-2) to human serum albumin (HSA) using highperformance liquid affinity chromatography. The chromatography was carried out using a HSA-immobilized column and a predominantly aqueous mobile phase (67 mmol/l sodium phosphate buffer/ propan-l-ol, 94 : 6 v/v). A small quantity of sulidac was injected onto the column while increasing concentrations of the same drug were added to the mobile phase. The capacity factor k’ serves as a measure for the binding affinity. The experiments were carried out at different temperatures in order to establish some thermodynamic parameters of the binding process. The values of the binding affinity constants decreased with the temperature. The free energy change was almost constant. Its large negative value suggests a spontaneous binding of sulidac to HSA. Both enthalpy and entropy changes of the binding process were also negative assuming donor-acceptor interactions between sulindac and its binding sites in HSA. Hydrogen bonds and salt linkages are supposed to make a major contribution to the binding of sulindac to HSA, while hydrophobic interactions seem to be of less importance.
Zusammenfassung
Thermodynamische Charakterisierung der Bindung von Sulindac an Human-Serumalbumin
Ziel der vorliegenden Studie war die Aufklärung der molekularen Bindung des entzündungshemmenden Wirkstoffes Sulindac (CAS 38194-50-2) an Human-Serumalbumin (HSA) mit Hilfe der Hochleistungs-Flüssig-Affinitätschromatographie unter Einsatz HSA-immobilisierter Säulen und einer mobilen Phase bestehend aus 67 mmol/l Natriumphosphatpuffer / 1-Propanol (94 : 6, v/v). Als Maß für die Bindungsaffinität diente der Kapazitätsfaktor k’. Zur Bestimmung der wichtigsten thermodynamischen Parameter wurde die Temperaturabhängigkeit der Bindung herangezogen. Dabei konnte festgestellt werden, daß die Bindungsassoziationskonstanten mit steigender Temperatur abnahmen, während die Änderung der freien Energie praktisch konstant blieb. Der hohe negative Wert dient als Hinweis für die spontane Bindung von Sulindac an HSA. Die Enthalpieund Entropieänderungen waren ebenfalls negativ. Dies führt zu der Annahme, daß im wesentlichen Donor-Akzeptor-Wechselwirkungen und Salzbrücken die Bindung von Sulindac beeinflussen, während hydrophobe Wechselwirkungen von geringerer Bedeutung sind.