Summary
A high performance liquid chromatographic (HPLC) method for the simultaneous determination of phenytoin (CAS 57-41-0), phenobarbital (CAS 50-06-6, phenobarbitone) and carbamazepine (CAS 298-46-4) is described. The serum was extracted with ethyl acetate, the dried extract was reconstituted in mobile phase and the aliquot was injected. The eluent drugs were detected at 230 nm. The mobile phase consisting of methanol: water: glacial acetic acid mixture (67:33:1, v/v/v) was used at a flow rate of 1 ml/min on C-18 column. The absolute recovery was above 96 % of all the three drugs over a concentration range of 0.5–50.0 µg/ml. The inter-day and intra-day precision relative standard deviation (RSD) ranged from 0.79–5.13 % and 0.11–6.81 %, respectively. The method is simple, rapid, accurate and sensitive and is presently used for therapeutic drug monitoring in epileptic patients. The results obtained with this method showed very good clinical correlation.
Zusammenfassung
Eine validierte Hochleistungsflüssigkeitschromatographie-Methode zur Simultanbestimmung von Phenytoin, Phenobarbital und Carbamazepin in menschlichem Serum
Es wird eine Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC)-Methode zur Simultanbestimmung von Phenytoin (CAS 57-41-0), Phenobarbital (CAS 50-06–6) und Carbamazepin (CAS 298-46-4) entwickelt. Humanserum wird mit Ethylacetat extrahiert, und der Extrakt wird nach Einengen in einem Aliquot mobiler Phase aufgenommen und auf die Säule gegeben. Die Detektion erfolgt bei 230 nm. Als mobile Phase wurde ein Gemisch von Methanol/Wasser/Eisssig (67:33:1, v/v/v) mit einer Fließrate von 1 ml/min und als stationäre Phase eine C-18-Säule verwendet. Über einen Konzentrationsbereich von 0,5 bis 50,0 µg/ml lag die absolute Wiederfindungsrate bei über 96 %. Die relative Standardabweichung betrug 0,79–5,13 % (von Tag zu Tag) und 0,11–6,81 % (in der Serie). Das einfache, schnelle, genaue und empfindliche Verfahren dient dem therapeutischen Drug Monitoring bei Epileptikern. Die mit dieser Methode erzielten Ergebnisse korrelierten sehr gut mit klinischen Befunden.
Key words
Carbamazepine, determination in human serum - CAS 50-06-6 - CAS 57-41-0 - CAS 298-46-4 - Phenobarbital, determination in human serum - Phenytoin, determination in human serum
