Aktivierung von RIG-I-like Helikasen (RLH) in Pankreaskarzinomzellen führt zu immunogenem Zelltod und Aktivierung tumorreaktiver zytotoxischer T-Zellen

Hintergrund: Die Infiltration von Pankreaskarzinomen mit T-Zellen korreliert mit einer günstigeren Prognose. Dem steht jedoch eine vom Tumor ausgehende Immunsuppression entgegen. Da Typ I Interferone (IFN) eine wichtige Rolle in der adaptiven Immunantwort gegen den Tumor spielen, könnte die Induktion von IFN im Tumorgewebe eine Strategie für die Immuntherapie von Tumoren darstellen. Wir untersuchten die immunologischen Konsequenzen von Apoptose, welche in Pankreaskarzinomzellen durch Aktivierung der RLH retinoic acid-inducible gene I (RIG-I) und melanoma differentiation-associated antigen 5 (MDA5) ausgelöst wird, bezüglich Aktivierung von dendritischen Zellen (DC), Antigenaufnahme und Antigenpräsentation.

Methoden: Murine Panc02 Zellen wurden mit Liganden von RIG-I (5′-Triphosphat modifizierte RNA) oder MDA5 (polyinosinic-polycytidylic acid) transfiziert. Die apoptotischen Tumorzellen (bzw. deren Überstände) wurden mit verschiedenen physiologischen DC-Populationen aus den Milzen von C57BL/6 Wildtyp bzw. diversen knock-out Mausstämmen kokultiviert. Die DC-Populationen wurden bezüglich Expression von Oberflächenmarkern, Zytokinproduktion, Antigenaufnahme und Fähigkeit zur Antigenpräsentation analysiert.

Ergebnisse: Aktivierung von RLH in Panc02 Zellen führte zur Produktion von IFN-β und CXCL10, sowie zu effektiver Apoptose. Zudem setzten die Tumorzellen Gefahrensignale, wie HMGB1 und hsp70, frei und wurden effektiv von CD8a⁺ DC phagozytiert. DC aus Kokulturen mit apoptotischen Tumorzellen zeigten eine Hochregulation der kostimulatorischen Moleküle CD69, CD80 und CD86, sezernierten IL-6 und CXCL10, und aktivierten OVA-spezifische zytotoxische T-Zellen. Interessanterweise spielten bei der DC-Aktivierung, die durch einen von den Tumorzellen sezernierten Faktor(en) ausgelöst wurde, TLR, RAGE, RIG-I-like Helikasen oder das NLRP3 Inflammasom keine Rolle. Hingegen war die DC-Aktivierung abhängig von Typ I IFN.

Schlussfolgerung: RLH-Aktivierung führt bei Pankreaskarzinomzellen zu einem immunogenen Zelltod, der zur Typ I IFN-vermittelten DC-Aktivierung und Präsentation von tumorassoziiertem Antigen durch CD8a⁺ DC führt. RLH-Liganden stellen somit eine interessante therapeutische Strategie dar, um eine adaptive Immunantwort gegen das Pankreaskarzinom zu induzieren.