Hemmung der Proliferation von humanen Kolonkarzinomzellen durch den M3-Acetylcholinrezeptor-Antagonisten Darifenacin

Einleitung: In neueren Untersuchungen konnte gezeigt werden, dass es nach Vagotomie zu einer Reduktion des Tumorwachstums im Gastrointestinaltrakt von Mäusen kommt. Ein möglicher Mechanismus ist die verminderte Aktivierung des muskarinischen M3-Acetylcholinrezeptors (M3R). In der vorliegenden Untersuchung wird der Einfluss des spezifischen M3R Antagonisten auf die Proliferation von humanen Kolonkarzinomzellen in vitro analysiert.

Material und Methoden: Mittels Western Blot wurde das Vorhandensein von M3R auf drei humanen Kolonkarzinomzelllinien (HT-29, SW480 und SW620) untersucht. Die quantitative Analyse erfolgte mittels FACS. Zunächst erfolgte die Stimulation von HT-29 und SW 480 Zellen mit dem Agonisten Carbachol. Um den antiproliferativen Effekt von Darifenacin zu untersuchen, wurden HT-29 und SW480 Zellen Darifenacin in steigenden Konzentrationen behandelt. Nach 48 Stunden wurden jeweils Proliferation und Überleben der Zellen mittels BrdU- und MTT-Assays untersucht.

Ergebnisse: Alle drei untersuchten Zelllinien exprimieren den M3 Rezeptor, die höchste Expression fand sich bei SW480 Kolonkarzinomzellen. Carbachol führte in Konzentrationen von 10µM und 100µM zu einer signifikanten Steigerung der Zellproliferation. Nach Exposition mit Darifenacin zeigte sich sowohl bei HT-29 als auch bei SW480 Zellen eine dosisabhängige Inhibition der Proliferation und des Überlebens.

Schlussfolgerung: Unsere Untersuchungen zeigen, dass Carbachol zu einer gesteigerten und Darifenacin durch Hemmung des muskarinischen Acetylcholinrezeptor M3R zu einer verminderten Proliferation von Kolonkarzinomzellen in vitro führt. Dieser Ansatz kann dazu beitragen, cholinerges Signaling beim Kolonkarzinom als neues prognostisches und therapeutisches Target zu charakterisieren.