Fluoreszierender Tetramethylrhodamin Methylester zur Erkennung des mitochondrialen Membranpotentials bei menschlichen Spermien

Das mitochondriale Membranpotential ist ein Indikator für die Funktion der Mitochondrien und die Spermienqualität. Dieses soll nun durch die Färbung mit fluoreszierendem Tetramethylrhodamin Methlester (TMRM), einem Farbstoff, der bisher nur in somatischen Zellen genutzt wurde, quantifiziert werden.

Zwischen November 2014 und Januar 2015 wurde das Membranpotential von Spermien aus Proben mit normaler und eingeschränkter Qualität mithilfe von Flow Zytometrie nach Färbung mit TMRM gemessen. Es wurden native Proben, aus Swim up, dem Swim up Pellet sowie nach Inkubation in Glucose-freiem Medium nach zwei und vier Stunden gefärbt.

Die Messung des Membranpotentials war problemlos durch Flow Zytometrie möglich. Die Anreicherung von TRMR korrelierte mit der Spermienqualität. Diese verbesserte sich im Swim up, die Spermien mit der geringsten Anreicherung von TRMR waren im Swim up Pellet. Ebenso nahmen das Membranpotential und die TRMR-Anreicherung ab, je länger die Spermien in Glucose-freiem Medium inkubiert wurden.

Die Anreicherung von TRMR korreliert mit dem Membranpotential und der Spermienqualität. Durch diese Methode kann die Spermienqualität einfach und schnell quantifiziert werden.