Laryngorhinootologie 2016; 95(04): 258-263
DOI: 10.1055/s-0035-1564213
Originalie
© Georg Thieme Verlag KG Stuttgart · New York

Bestimmung elastischer Eigenschaften von Plattenepithelkarzinomzellen mittels Rasterkraftmikroskopie

Physical Properties of Squamous Cell Carcinoma Cells using Atomic Force Microscopy
J. Kristin
1   Hals-Nasen-Ohrenklinik, Universitätsklinikum Düsseldorf, Düsseldorf
,
S. Steeger
2   Institut für angewandte Physik/Nanotechnologie, Universität Düsseldorf, Düsseldorf
,
T. Schreyer
2   Institut für angewandte Physik/Nanotechnologie, Universität Düsseldorf, Düsseldorf
,
S. Hansen
3   Klinik für Hals-Nasen-Ohrenheilkunde, Universitätsklinikum Essen, Essen
,
M. F. Glaas
1   Hals-Nasen-Ohrenklinik, Universitätsklinikum Düsseldorf, Düsseldorf
,
I. Stenin
1   Hals-Nasen-Ohrenklinik, Universitätsklinikum Düsseldorf, Düsseldorf
,
M. Getzlaff
2   Institut für angewandte Physik/Nanotechnologie, Universität Düsseldorf, Düsseldorf
,
J. Schipper
1   Hals-Nasen-Ohrenklinik, Universitätsklinikum Düsseldorf, Düsseldorf
› Institutsangaben
Weitere Informationen

Publikationsverlauf

eingereicht 20. Juli 2015

akzeptiert 05. September 2015

Publikationsdatum:
08. Dezember 2015 (online)

Zusammenfassung

Einleitung: Maligne und benigne Zellen unterscheiden sich nach bisherigen Untersuchungen durch ihre Kern-Plasma-Relation und an Hand ihrer Elastizität. Zur Messung dieser mechanischen Zelleigenschaft eignet sich die Anwendung eines Rasterkraftmikroskops. Wenn Zellen verschiedener Dignität ein unterschiedliches Resonanzverhalten zeigen, weil sie eine andere Elastizität besitzen, wäre eine selektive Ablation von spezifischen Gewebearten mittels Ultraschallwellen denkbar. Das Ziel unserer Arbeit ist eine hochselektive Ablation von Tumorgewebe unter Schonung des gesunden Gewebes zu erreichen.

Material und Methode: Mittels Rasterkraftmikroskopie wurden Elastizitätsmessungen und eine ortsaufgelöste physikalische Zellcharakterisierung von Tumorzellen (UD-01 Zelllinie) durchgeführt. In einem weiteren Schritt wurde ein Ultraschallapplikator unter definierten Bedingungen über einem Zellrasen positioniert und die morphologischen Veränderungen während der Ultraschallbehandlung bei einer Frequenz von 24 kHz dokumentiert.

Ergebnisse: Es zeigten sich verschiedene Elastizitäten auf der Plattenepithelkarzinomzelle, abhängig von der Lage und der untersuchten Lokalisation. Wir konnten bezüglich der Ultraschallanwendung eine maximale Amplitude definieren, bis zu der morphologische Zellveränderungen ausschließlich durch Ultraschallanregung entstehen, unabhängig von entstehender Erwärmung. Nach Behandlung eines intakten Zellrasens mit fokussiertem Ultraschall konnten Verklumpungen und Ablösungen von der Oberfläche beobachtet werden.

Zusammenfassung: Das Rasterkraftmikroskop eignet sich zur Bestimmung der individuellen Zellelastizität mit einer sehr hohen Ortsauflösung. Die ermittelten Daten könnten die Grundlage für Behandlungsmodalitäten sein, die zu einer superselektiven Schädigung maligner Zellen führen.

Abstract

Introduction: Malignant and benign cells differ according to their elasticity. An atomic force microscope is a useful tool for measuring these mechanical cell properties. If cells of different dignity show different resonance behavior, due to their different elasticity, a selective ablation of specific tissue types by ultrasound would be possible. The goal is a highly selective ablation of tumor tissue without damaging healthy tissue.

Materials and Methods: We performed elasticity measurements of tumor cells (UD-01 cell line) with an atomic force microscope. In a further step, an ultrasound applicator has been positioned and the morphological changes of the cells during the treatment were documented.

Results: Different elasticities on the squamous cells were measured, depending on the location. Below a defined maximum amplitude the morphological cell changes were caused solely by ultrasonic excitation.

Summary: The atomic force microscope is suitable for the determination of the individual cell elasticity. The data collected could be the basis for treatment modalities that lead to a very selective damage for malignant cells.

 
  • Literatur

  • 1 Hardisson D. Molecular pathogenesis of head and neck squamous cell carcinoma. Eur Arch Otorhinolaryngol 2003; 260: 502-508
  • 2 Parkin DM, Bray F, Ferlay J, Pisani P. Estimating the world cancer burden: Globocan 2000. 2001; 94: 153-156
  • 3 Krebs in Deutschland 2009/2010. 9. Ausgabe. Robert Koch-Institut (Hrsg) und die Gesellschaft der epidemiologischen Krebsregister in Deutschland e.V. (Hrsg). Berlin 2013 S. 16
  • 4 Behm RJ, Hösler W, Ritter E, Binning G. Correlation between domain boundaries and surface steps: A scanning-tunneling-microscopy study on reconstructed Pt(100). Phys Rev Lett 1986; 56: 228-231
  • 5 Lekka M, Laidler P, Gil D, Lekki J, Stachura Z, Hrynkiewicz AZ. Elasticity of normal and cancerous human bladder cells studied by scanning force microscopy. Eur Biophys J 1999; 28: 312-316
  • 6 Park S, Koch D, Cardenas R, Käs J, Shih CK. Cell motility and local viscoelasticity of fibroblasts. Biophys J 2005; 89: 4330-4342
  • 7 Crouzet S, Rouviere O, Martin X, Gelet A. High-intensity focused ultrasound as focal therapy of prostate cancer. Curr Opin Urol 2014; 24: 225-230
  • 8 Hesley GK, Gorny KR, Woodrum DA. MR-guided focused ultrasound for the treatment of uterine fibroids. Cardiovasc Intervent Radiol 2013; 36: 5-13
  • 9 Pelling AE, Sehati S, Gralla EB, Valentine JS, Gimzewski JK. Local nanomechanical motion of the cell wall of Saccharomyces cerevisiae. Science 2004; 305: 1147-1150
  • 10 Ballo H, Koldovsky P, Hoffmann T, Balz V, Hildebrandt B, Gerharz CD, Bier H. Establishment of four cell lines derived from human head and neck squamous cell carcinomas for an autologous tumor-fibroblast in vitro model. Anticancer Research 1999; 19: 3827-2836
  • 11 Bhadriraju K, Hansen LK. Extracellular matrix- and cytoskeleton-dependent changes in cell shape and stiffness. Exp Cell Res 2002; 278: 92-100
  • 12 Yamazaki D, Kurisu S, Takenawa T. Regulation of cancer cell motility through actin reorganization. Cancer Sci 2005; 96: 379-386
  • 13 Hessler JA, Budor A, Putchakayala K, Mecke A, Rieger D, Banaszak Holl MM, Orr BG, Bielinska A, Beals J, Baker Jr J. Atomic force microscopy study of early morphological changes during apoptosis. Langmuir 2005; 21: 9280-9286
  • 14 Cross SE, Jin Y-S, Rao J, Gimzewski JK. Nanomechanical analysis of cells from cancer patients. Nat Nano 2007; 2: 780-783
  • 15 Guck J, Schinkinger S, Lincoln B, Wottawah F, Ebert S, Romeyke M, Lenz D, Erickson HM, Ananthakrishnan R, Mitchell D, Käs J, Ulvick S, Bilby C. Optical deformability as an inherent cell marker for testing malignant transformation and metastatic competence. Biophysical Journal 2005; 88: 3689-3698
  • 16 Suresh S. Biomechanics and biophysics of cancer cells. Acta Materialia 2007; 3: 413-438
  • 17 Rotsch C, Radmacher M. Drug-induced changes of cytoskeletal structure and mechanics in fibroblasts: An atomic force microscopy study. Biophysical Journal 2000; 78: 520-535
  • 18 Moustakas A, Stournaras C. Regulation of actin organisation by TGF- beta in H-rastransformed fibroblasts. Journal of Cell Science 1999; 112: 1169-1179
  • 19 Suresh S, Spatz J, Mills JP, Micoulet A, Dao M, Lim CT, Beil M, Seufferlein T. Connections between single-cell biomechanics and human disease states: gastrointestinal cancer and malaria. Acta Biomaterialia 2005; 1: 15-30
  • 20 Hou HW, Li QS, Lee G, Kumar AP, Ong CN, Lim CT. Deformability study of breast cancer cells using microfluidics. Biomedical Microdevices 2009; 11: 557-564
  • 21 Lekka M, Laidler P. Applicability of AFM in cancer detection. Nat Nano 2009; 4: 72-73
  • 22 Xu W, Mezencev R, Kim B, Wang L, McDonald J, Sulchek T. Cell stiffness is a biomarker of the metastatic potential of ovarian cancer cells. PLoS One 2012; 7
  • 23 Rebelo LM, de Sousa JS, Mendes Filho J, Radmacher M. Comparison of the viscoelastic properties of cells from different kidney cancer phenotypes measured with atomic force microscopy. Nanotechnology 2013; 24: 055102
  • 24 Sokolov I. Cancer NanotechnologyAtomic Force Microscopy in Cancer Cell Research. Chapter 1; Edited by Singh Nalwa H, Webster T. Pages 1-17
  • 25 Berdyyeva TK, Woodworth CD, Sokolov I. Human epithelial cells increase their rigidity with ageing in vitro: direct measurements. Phys Med Biol 2005; 50: 81-92
  • 26 JPK Instruments, Handbook, Application Notes
  • 27 Shoelson B, Dimitriadis EK, Cai H, Kachar B, Chadwick RS. Evidence and implications of inhomogeneity in tectorial membrane elasticity. Biophys J 2004; 87: 2768-2777
  • 28 Sokolov I. Atomic Force Microscopy in Cancer Cell Research. In: Nalwa HS. et al. (Hrsg.) Cancer Nanotechnology. Amer: Sci. Publ.; 2007
  • 29 Lekka M, Gil D, Pogoda K, Dulińska-Litewka J, Jach R, Gostek J, Klymenko O, Prauzner-Bechcicki S, Stachura Z, Wiltowska-Zuber J, Okoń K, Laidler P. Cancer cell detection in tissue sections using AFM. Arch Biochem Biophys 2012; 518: 151-156
  • 30 Cross SE, Jin YS, Rao J, Gimzewski JK. Nanomechanical analysis of cells from cancer patients. Nat Nanotechnol 2007; 2: 780-783