Phenotypische Analyse der Immunzellsignatur in NAFLD

Hintergrund und Ziele:

Es wird angenommen, dass die nicht-Alkohol induzierte Fettleber Erkrankung (NAFLD) durch eine Kombination von sog. „multiple parallel hits“ verursacht wird, aber die genauen Mechanismen sind immer noch unklar. Es ist unklar, ob NAFLD-Patienten eine immunologische Signatur aufzeigen, die mit krankheitsbedingten Stoffwechselveränderungen korreliert.

Methoden:

Monoukleäre Zellen aus peripherem Blut (PBMC) von Patienten mit verschiedenen Stadien der NAFLD (n = 20), Zellextrakte aus Leberbiopsien von Patienten mit NAFLD (n = 20) und mononukleäre Zellen einer Kontrollkohorte (n = 20) wurden gesammelt und ein umfassendes Multiparameter-FACS-Panel entwickelt.

Durch Fluoreszenz markierte Antikörperpanels für die Durchflusszytometrieanalyse der Frequenz von T-Zellen als Untergruppen von Leukozyten (CD45, CD3, CD4, CD8), die T-Helfer-Subgruppen TH1, TH2 und TH17 Zellen (CD45RA, CCR6, CCR4, CXCR3, CD161),T central memory, naïve T cells, TemRA and TemRO T cells (CD45RA, CCR7), Tregs (CD25, CD127), Natural killer cells (CD16, CD56, NKG2D) als unkonventionelle T-Zellen die mit mucosa associated invariant T cells (MAIT) (CD161, TCRVα7.2), invariante natürliche Killer-T Zellen (iNKT) (TCRVα24Jα18) und γδT Zellen (panγδ, TCRVδ2) sowie Marker für Seneszenz (CD57) und Aktivierung (CD38, HLA-DR) wurden etabliert.

Ergebnisse:

Wir fanden keine signifikanten Unterschiede der Frequenz, Differenzierung oder Aktivationsstatus von T-Helfer, zytotoxischen T, NK, NKT, MAIT, γδT-Zellen in PBMC zwischen NAFLD Patienten und gesunden Kontrollen.

Schlussfolgerung:

Unsere Ergebnisse zeigen eine unaufällige zelluläre Immunsignatur im peripheren Blut von NAFLD Patienten. Der Fokus weiterer Untersuchungen sollte auf der Charakterisierung intrahepatischen Immunzellen liegen.