Download PDF
Nuklearmedizin 1963; 03(01): 39-50
DOI: 10.1055/s-0037-1621203
Originalarbeiten — Original Articles — Travaux Originaux
Schattauer GmbH

Die quantitative Bestimmung der Verteilung von S35-Sulfat bei der Maus mittels Autoradiographie[*]

H. Kutzim
1   Aus der Nuklearmedizinischen Abteilung der Medizinischen Klinik (Prof. Dr. H. W. Knipping) und der Hautklinik (Prof. Dr. J. Vonkennel) der Universität Köln
› Author Affiliations
Further Information

Publication History

Publication Date:
09 January 2018 (online)

    Permissions and Reprints

Zusammenfassung

Es wird eine neue Methode der Eichung von Autoradiographien ganzer Mäuse beschrieben.

Die Eichmethode beruht darauf, daß gleichzeitig mit der Maus PVC-Röhrchen geschnitten werden, die eine ansteigende Konzentration der verwendeten radioaktiven Substanz in Polyglykol gelöst enthalten. Das Polyglykol wird auf das gleiche spez. Gewicht der Gewebe des histologischen Schnittes eingestellt. Eine unterschiedliche Schnittdicke verschiedener Präparate ist ohne Bedeutung, da eine verstärkte Schwärzung des Films durch eine größere Schnittdicke der Eichpräparate gleichzeitig mit einer entsprechend stärkeren Schwärzung über den Organen verbunden ist.

Die S35-Konzentration in μC pro Gramm Gewebe ist der Schwärzung der Filmschicht direkt proportional. Mit Hilfe dieser Methode wird der S35-Sulfatgehalt der verschiedenen Gewebe bei der Maus in μC/g ermittelt. Der Knorpel hatte die höchsten Speicherwerte für S35-Sulfat.

Larynx- und Gelenkknorpel zeigten in bezug auf Verlauf und Höhe der Speicherung ein unterschiedliches Verhalten, wobei der Larynxknorpel einen erhöhten S35-Durchgang hatte.

Auf die Frage der zellulären Entstehung des Chondroitinsulfats als Bestandteil der Knorpel- und Knochengrundsubstanz wird kurz eingegangen.

Summary

A new method of calibrating autoradiographies of whole mice is described.

The method consists of preparing simultaneously with the slices of the mouse, slices of PVC tubes which contain the radioactive substance in polyglycol solution in increasing concentrations. The polyglycol is prepared in such a way that it has the same specific gravity as the tissue of the histological preparation. Differences in slice thickness are without effect since an increased blackening of the film caused by thicker slices of the tubes is accompanied by a correspondingly increased blackening over the tissue slices.

The S35 concentration in μC/gm tissue is directly proportional to the degree of blackening of the film. Using this method the S35 sulfate content of various tissues of he mouse is determined in μC/gm. Cartilage showed the highest uptake of S35 sulfate. There were differences in turnover and maximum uptake between cartilage of larynx and of joints, with larynx cartilage showing an increased S35 turnover.

The question of the cellular origin of chondroitine sulfate as part of the basic matrix of cartilage and bone is briefly discussed.

Résumé

Une méthode d’étalonnage des autoradiographies de souris entières est décrite. Tout en coupant la souris on produit des coupes de tubes en p. v. c. contenant une concentration montante de la substance radioactive appliquée, diluée en polyglycole. Le polyglycole est mis à la même densité spécifique que le tissu. Il n’est pas d’importance que les coupes sont de différentes épaisseurs étant donné qu’un noircissement plus fort de la pellicule par suite d’une coupe plus épaisse se produit aussi bien sur le tissu que sur les préparations d’étalonnage.

La concentration du S35 en μc par gramme de tissu est directement proportionnelle au noircissement de la pellicule. A l’aide de cette méthode on détermine la concentration en S35 en μc/g dans les différents tissus de la souris. Le cartilage montrait la fixation la plus élevée pour le S35-sulfate. Quant au turnover et au maximum de la fixation le cartilage du larynx et celui des articulations se comportaient d’une manière différente; le cartilage du larynx accusait un passage plus rapide de S35.

La question de la formation cellulaire du sulfate de chondroitine comme composé de la substance basale du cartilage et de l’os est discutée.

* Herrn Prof. Vonkennel zum 65. Geburtstag gewidmet.


 

  • Literatur

  • 1 Amprino R. Acta anat. (Basel) 24: 121 1955; zitiert von Johnston, P. M., siehe unten.
    CrossrefPubMed
  • 2 Boström H, Odeblad E, Friberg U. A quantitative autoradiographic study of the incorporation of S35 in tracheal cartilage. Arch. Biochem. 38: 283 1952;
    CrossrefPubMedGoogle Scholar
  • 3 Boström H. E, Odeblad E, Friberg U. Chemical and autoradiographic studies on the sulfat exchange in sulfomucopolysaccharides. Ark. Kemi 6: 43 1953;
    Google Scholar
  • 4 Bélanger L. E. Autoradiographic visualization of the entry and transit of S35 in cartilage, bone and dentine of young rats and the effect of hyaluronidase in vitro. Canad. J. Biochem. 32: 161 1954;
    Google Scholar
  • 5 Campbell D. Track autoradiographs with iron59 and sulfur35 with quantitative evaluation. Nature (London) 167: 274 1951;
    CrossrefPubMedGoogle Scholar
  • 6 Campbell D, Persson B. H. Use of track autoradiography in studies on the sulfur metabolism of connective tissues. Experientia (Basel) 7: 304 1951;
    Google Scholar
  • 7 Doniach J, Pelc S. R. Autoradiograph technique. Brit. J. Radiol. 23: 184 1950;
    CrossrefGoogle Scholar
  • 8 Dudley R. A, Dobyns B. M. The use of autoradiographs in the quantitative determination of radiation dosages from Ca45 in bone. Science 109: 327 1949;
    CrossrefPubMedGoogle Scholar
  • 9 Dziewiatkowski D. D, Benesch R. E, Benesch R. On the possible utilization of sulfate sulfur by the suckling rat for the synthesis of chondroitinsulfate as indicated by the use of radioaktiv sulfur. J. Biol. Chem. 178: 931 1949;
    PubMedGoogle Scholar
  • 10 Dziewiatkowski D. D. Effect of thyroxine and thiouracil on S35 deposition in articular cartilage. J. Biol. Chem. 189: 717 1951;
    PubMedGoogle Scholar
  • 11 Dziewiatkowski D. D. Radioautographic visualization of sulfur35 disposition in the articular cartilage and bone of suckling rats following injection of labelled sodium sulfat. J. exp. Med. 93: 451 1951;
    CrossrefPubMedGoogle Scholar
  • 12 Dziewiatkowski D. D. Radioautographic studies on S35-labelled sulfat-sulfur metabolism in the articular cartilage and bone of suckling rats. Transactions 4th Conference on Metabolic Interrelations. 74 1952
    PubMedGoogle Scholar
  • 13 Dziewiatkowski D. D. Some aspects of the metabolism of chondroitinsulfat — S35 in the rat. J. Biol. Chem. 223: 239 1956;
    PubMedGoogle Scholar
  • 14 Hermann W, Hartmann G, Brust R. Das Auflösungsvermögen mikroautoradiographischer Aufnahmen und Untersuchungen über seine Abhängigkeit von der Energie der verwendeten Betastrahlung. Atompraxis 7: 315 1961; und 8: 8 (1962).
    Google Scholar
  • 15 Johnston P. M. Isotopes in Studies on the Metabolism of Bones and Teeth. In: Schwiegk H, Turba F. „Künstliche radioaktive Isotope in Physiologie, Diagnostik und Therapie“. Springer-Verlag; Berlin, Göttingen, Heidelberg: 1961
    Google Scholar
  • 16 Kutzim H. Quantitative, autoradiographische Untersuchungen über Stoffwechselvorgänge mittels histologischer Schnitte von ganzen Tieren. Erstes europäisches Symposion über autoradiographische Techniken in der med. Wissenschaft. Rom: 17.—18. 6. 1961
    Google Scholar
  • 17 Kutzim H. Autoradiographische Untersuchungen über die Verteilung von Jodid, Trijodthyronin und Thyroxin bei der Maus. Zschr. f. ges. exp. Medizin 135: 377 1962;
    Google Scholar
  • 18 Lamerton L. F, Harris E. B. Resolution and sensitivity considerations in autoradiography. J. Phot. Science 2: 135 1954;
    Google Scholar
  • 19 Laurence L. L. Quantitative differential fixation of sulfate by tissues maintained in vitro. I. Sulfate fixation as a function of age for embryonic tissues. Cancer 3: 725 1950;
    CrossrefPubMedGoogle Scholar
  • 20 Odeblad E. Contributions to the theory and technique of quantitative autoradiography with P32 with special reference to the granulosa tissue of the Graafian follicles in the rabbit. Acta radiol.. Suppl. 93 1952
    PubMedGoogle Scholar
  • 21 Odeblad E, Boström H. Autoradiographic study of incorporation of S35-labelled sodiumsulfat in different organs of adult rats and rabbits. Acta path microbiol. scand. 31: 329 1952;
    Google Scholar
  • 22 Palmgren A. Tape for microsectioning of very large, hard or brittle specimens. Nature (London) 174: 46 1954;
    PubMedGoogle Scholar
  • 23 Pelc S. R, Glücksmann A. Exp. Cell Res. 8: 336 1955; zit. bei: Johnston 15.
    CrossrefPubMed
  • 24 Perry R. Quantitative autoradiography with special emphasis on the use of tritium. Quantitative, autoradiographische Untersuchungen über Stoffwechselvorgänge mittels histologischer Schnitte von ganzen Tieren. Erstes europäisches Symposion über autoradiographische Techniken in der med. Wissenschaft. Rom: 17.—18. 6. 1961
    Google Scholar
  • 25 Schiller S, Mathews M. B, Cifonelli J. A, Dorfman A. The metabolism of mucopolysaccharides in animals. III. Further studies on skin utilizing C14-glucose, C14-acetate and S35-sodiumsulfat. J. biol. Chem. 218: 139 1956;
    PubMedGoogle Scholar
  • 26 Uliberg S. Studies on the distribution and fate of S35-labelled benzylpenicillin in the body. Acta Radiol.. Suppl. 118 1954
    PubMedGoogle Scholar