Immunfluoreszenzmikrophotometrie zur quantitativen Erfassung antithrombozytärer Autoantikörper

Zusammenfassung

In der vorliegenden Arbeit wurde eine Methode zur Bestimmung antithrombozytärer Antikörper mittels Immunfluoreszenz und Fhioreszenzmikrophotometrie beschrieben und an Beispielen erläutert. Es konnte eine lineare Beziehung zwischen Antikörpermenge (SerumVerdünnung) und Fluoreszenzintensität bei Anwendung der indirekten Immunfluoreszenzmethode nachgewiesen werden. Durch Bestimmung der mittleren Fluoreszenzintensität der Thrombozyten nach Inkubation mit in Stufen verdünntem Immunthrombozytopenikerserum und Vergleich der Werte mit der Basisfluoreszenz der Thrombozyten wurde ein Titer bestimmt, der jener Serumverdünnung entsprach, deren zugehöriger Thrombozytenfluoreszenzintensitätswert sich von der Basisfluoreszenz nicht mehr signifikant unterschied.

• Literatur

• 1 Corn M, Upshaw J. D. Evaluation of Platelet Antibodies in Idiopathic Thrombocytopenic Purpura. Arch, intern. Med 109: 157 1962;
• 2 Denk H, Kovac W. Fluoreszenzmikrophotometrische Untersuchungen über die Beeinflussung der Grippeinfektion der Maus durch Adamantin. Z. Bakt., I. Orig 202: 327 1967;
• 3 Ehrlich R, Ehrmantraut H. C. Instrumental estimation of bacterial population by fluorescence microskopy. Appl. Microbiol 03: 231 1955;
• 4 Goldman M. Evaluation of a fluorescent antibody test for amebiasis using two widely differing strains as antigen. Amer. J. trop. Med. Hyg 15: 694 1966;
• 5 Goldman M. An improved microfluorimeter for measuring brightness of fluorescent antibody reactions. J. Histochem. Cytochem 15: 38 1967;
• 6 Goldman M. Fluorescent antibody methods. Academic press; New York, London: 1968
• 7 Goldman M, Carver R. K. Microfluorimetry of cells stained with fluorescent antibody. Exp. Cell Res 23: 265 1961;
• 8 Goldman M, Gleason N. N, Carver R. K. Antigenic analysis of entamoeba histolytica by means of fluorescent antibody. III. Reactions of the Laredo strain with five antihistolytica sera. Amer. J. trop. Med. Hyg 11: 341 1962;
• 9 Goldman M, Cannon L. T. Antigenic analysis of entamoeba histolytica by means of fluorescent antibody. V. Comparison of 15 strains of entamoeba with information on their pathogenicity to guinea pigs. Amer. J. trop. Med. Hyg 16: 245 1967;
• 10 Humphrey J. H. Origin of blood platelets. Nature (Lond.) 176: 38 1955;
• 11 Kunz Ch. The use of the immunfluorescent method and microphotometry for the differentiation of arboviruses. Virology 24: 672 1964;
• 12 Kunz Ch. Die Verwendbarkeit der Fluoreszenz-Serologie und der Mikrophotometrie für die Differenzierung von Viren des Tick-Borne Encephalitis (TBE)-Komplexes. Z. Bakt., I. Orig 196: 416 1965;
• 13 Mansberg H. P, Kusnetz J. Quantitative fluorescence mikroscopy: fluorescent antibody automatic reading techniques. J. Histochem. Cytochem 14: 260 1966;
• 14 McKenna J. L, Pisciotta A. V. Fluorescence of megacaryocytes in idiopathic thrombocytopenic purpura (ITP) stained with fluorescent antiglobulin serum. Blood 19: 664 1962;
• 15 Miescher P. A, Vorlaender K. O. Immunopathologie in Klinik und Forschung. Georg Thieme; Stuttgart: 1961
• 16 Mueller-Eckhardt Ch, Boehm H. Zum Problem des Nachweises antithrombocytärer Autoantikörper. Vergleichende Untersuchungen an thrombopenischen und nichtthrombopenischen Patienten mit dem Antiglobulin-Konsumptionstest und dem Fluoreszenz-Antiglobulintest. Klin. Wschr 46: 986 1968;
• 17 Pittman B, Herbert G. A, Cherry W. B, Taylor G. C. The quantitation of non specific staining as a guide for improvement of fluorescent antibody conjugates. J. Immunol 98: 1196 1967;
• 18 Runge W. J. A recording microfluorospectrophotometer. Science 151: 1499 1966;
• 19 Silber R, Benitez R, Eveland W. C, Akeroyd J. H, Dunne ChJ.. The application of fluorescent antibody methods to the study of platelets. Blood 16: 958 1960;
• 20 Sprague ChC.. Use of the fluorescent antibody technique in the detection of antiplatelet antibodies. In: Blood platelets. Henry Ford Hospital, Internat. Symposium, Detroit 1960; 689 London: 1961
• 21 Vacca G. Immunfluorescenza di megacariociti e piastrine nella porpora thrombocitopenica essenziale. Minerva medica 54: 119 1963;
• 22 Vazquez J. J, Lewis J. H. Immunocytochemical studies on platelets. The demonstration of a common antigen in human platelets and megacaryocytes. Blood 16: 968 1960;