EP3 reguliert Proliferation und Migration in Endometriumskarzinomzellen in vitro

Hintergrund:

Unsere Arbeiten zur prognostischen Bedeutung des membranständigen Prostaglandinrezeptors EP3 zeigten, dass dieser Rezeptor ein negativer Prognostikator für Patientinnen mit Endometriumskarzinom darstellt. Weiterhin konnten wir eine negative Korrelation der Expression des Estrogenrezeptor-beta und EP3 feststellen. Innerhalb dieser Studie sollten nun die molekularen Mechanismen des EP3-Signalweges untersucht werden.

Material und Methoden:

Die Endometriumskarzinomzelllinie RL95-2 wurde neben 3 anderen Zelllinien (RL95-2, Ishikawa, HEC-1-A, und HEC-1-B) aufgrund ihres EP3-Expressionslevels für die in vitro Versuche ausgewählt. Das Proliferationsverhalten wurde durch Zugabe des EP3 Antagonisten (L-798,106) zu RL95-2 Zellen mithilfe des BrdU-uptake und das Migrationsverhalten mithilfe eines „wound healing assay“ untersucht. Western blots, Ras-GTP Assay und Chemiluminescent Immunometric Assay wurden zur Analyse der Expression von ERβ, Ras und Estradiol durchgeführt.

Ergebnisse:

Der BrdU Assay zeigte, dass der EP3 Antagonist die Zellproliferation signifikant hemmt (P < 0,05). Der „Wound healing (scratch) assay” zeigte ebenfalls, dass der EP3 Antagonist die Migration von RL95-2 Zellen signifikant hemmt (P < 0,05). L-798,106 induzierte die Expression von ERβ (P < 0,001), hatte aber keinen Einfluss auf die Estradiol Biosynthese. Die Aktivität von Ras wurde signifikant durch den EP3 Antagonisten inhibiert (P < 0,001).

Diskussion:

Mithilfe unserer Untersuchungen konnten wir zeigen, dass EP3 eine Rolle bei der Proliferation und Migration von Endometriumskarzinomzellen spielt. Zusätzlich konnten wir zeigen, dass EP3 den Phenotyp von RL95-2 Zellen über ERβ/Ras zu beeinflussen scheint.