Evaluation der Biodistribution von F-18-siPSMA-14 im HET-CAM Modell

Ziel/Aim Die Evaluation neu entwickelter Radiopharmaka ist stets mit Tierversuchen verbunden. Das HET-CAM-Modell ist eine vielversprechende Alternative um im Sinne der 3R-Prinzipien die Anzahl der notwendigen Tierversuche durch initiale Studien im Hühnerei zu verringern. Mit Hilfe des hochaktuellen F-18-siPSMA-14 soll das Modell insbesondere im Hinblick auf Quantifizierbarkeit und Reproduzierbarkeit der Daten validiert werden.

Methodik/Methods Tumorxenografts einer PSMA-positiven (LNCaP C4-2) und einer PSMA-negativen Zelllinie (PC-3) wurden auf der CAM etabliert. MRT- und PET-Messungen erfolgten zwischen Embryo-Entwicklungstag 12 und 16. Im MRT (BioSpec 117/16) wurden ein Übersichtsscan (Flash3D) und ein hochauflösender Scan (RARE) der Tumorregion durchgeführt. Nach i.v. Applikation des Peptids erfolgte eine dynamische PET (Focus 120) über 1h. Die Tumore wurden nach der Messung entnommen und die Aktivität im y-Counter bestimmt. Für den Nachweis von PSMA wurden die Tumore lysiert und Westernblots (WB) erstellt.

Ergebnisse/Results In der WB-Analyse wurde PSMA nur in den LNCaP C4-2 Zellen nachgewiesen. Das Tumorvolumen wurde auf Basis der MRT-Daten bestimmt LNCaPC4-2 (35,4 ± 7,8)mm³/PC-3 (29,6 ± 9,7) mm³ (n = 4). Eine höhere akkumulierte Aktivität konnte nach Überlagerung der PET- und MRT-Daten in den LNCaP C4-2 Tumorxenografts nachgewiesen werden: LNCaP C4-2 (1,1 ± 1,3) %IA/ml; PC-3 (0,7 ± 1,1) %IA/ml; C4-2/PC-3=1,8 ± 1,4. Die Daten des y-Counters ergeben vergleichbare Ergebnisse: LNCaP C4-2 (8,7 ± 1,5) %IA/ml; PC-3 (5,5 ± 1,6) %IA/ml; C4-2/PC-3 = 1,6 ± 0,3.

Schlussfolgerungen/Conclusions Sowohl im PET als auch im y-Counter wurde die erhöhte Anreicherung von F-18-siPSMA-14 im PSMA-positiven Tumor erfolgreich im HET-CAM-Modell nachgewiesen. Die Methoden erlauben die exakte Tumorvolumenbestimmung und Quantifizierung der Peptidanreicherung. Das HET-CAM-Modell hat großes Potential für die Evaluierung neuer Radiopharmaka und kann dazu beitragen, die Anzahl nötiger Tierexperimente zu reduzieren.

Publication History

Article published online:
08 April 2021