Humanes Amniontransferrin stimuliert die Progesteronproduktion von humanen Trophoblastzellen in vitro

Zusammenfassung

Fragestellung: Transferrin sichert als Transportprotein die Eisenversorgung des Feten in der Schwangerschaft. Humanes Amniontransferrin (hAT) kommt in hohen Konzentrationen im Fruchtwasser vor [6]. Seine Glykosylierung unterscheidet sich von der des Serumtransferrins. Die Funktion des Amniontransferrins ist noch weitgehend ungeklärt. Besonders glykosyliertes Transferrin wird auch vom Trophoblasten produziert. Die Kohlenhydratstrukturen des hAT sind mit dem vom Trophoblasten produzierten Transferrin identisch. Wir untersuchten den Einfluß von hAT und im Vergleich dazu den Einfluß von holo- und apo-Serumtransferrin auf die Progesteron-, Kortisol- und hCG-Freisetzung von Trophoblastzellen in vitro. Material und Methoden: Die Trophoblastzellisolierung aus Terminplazenten erfolgte nach grober Präparation von Kotyledonen und anschließender mehrschrittiger DNAse I und Trypsinverdauung sowie Percoll-Gradienten-Zentrifugation. Die gewonnenen Trophoblastzellen wurden in Kultur gebracht und es erfolgte die einmalige Zugabe von Amniontransferrin, holo- oder apo-Serumtransferrin. Die Produktion von Progesteron, Kortisol und hCG wurde in jeweils 8 h-Schritten gemessen. Parallel dazu wurden die Hormonwerte einer nicht stimulierten Kultur aus der gleichen Plazenta bestimmt. Ergebnisse: Mit Amniontransferrin (50 µg/ml; 100 µg/ml; 250 µg/ml) versetzte Trophoblastzellen wiesen in vitro eine signifikant erhöhte Progesteronfreisetzung im Vergleich zu unbehandelten Zellen auf. Holo- und apo-Serumtransferrin zeigten keine Effekte auf die Progesteronfreisetzung der Trophoblastzellen in vitro. Weder hAT noch holo- oder apo-Serumtransferrin hatten einen Effekt auf die Kortisol- und hCG-Freisetzung in vitro. Diskussion: Progesteron ist Marker für den Differenzierungsprozeß der Trophoblastzellen in Synzytiotrophoblastzellen. Die Ergebnisse zeigen, daß hAT durch Stimulierung der Progesteronproduktion in vitro in plazentare Regulationsmechanismen der Progesteronsekretion involviert ist.

Human amniotic fluid transferrin stimulates progesterone production in human trophoblast cells in vitro

Summary

Objective: During pregnancy transferrin plays a key role as an iron transport protein to serve the increased fetal demands of iron. Transferrin is also present in relatively high concentrations in amniotic fluid [6], showing a different glycosylation compared with serum transferrin. The biological function of human amniotic fluid transferrin (hAFT) is still unknown. In addition trophoblast cells also synthesise transferrin. Transferrin synthesised by the trophoblast shows a special glycosylation. We found identical carbohydrate structures of hAFT and trophoblast transferrin. We investigated the influence of hAFT on the progesterone-, cortisol- and hCG-release of trophoblasts in culture compared with the influence of human holo- and apo-serum transferrin on the release of these hormones. Material and methods: Cytotrophoblast cells were prepared from human term placentae by standard trypsin-DNAse dispersion of villous tissue followed by a percoll gradient centrifugation step. When placed in culture, the trophoblasts were incubated with varying concentrations (50-300 µg/ml) of human amniotic fluid- and serumtransferrin. Unstimulated cells of each placenta used as controls. Culture supernatants were assayed for progesterone, hCG and cortisol by enzyme-immunometric methods. Results: Our results show, that the release of progesterone increased in hAFT-treated cell cultures compared to untreated cell cultures. Holo- and apo-serumtransferrin did not show any effect on the progesterone release by trophoblast cells in vitro. Neither hAFT nor holo- and apo-serum transferrin had any effect on the cortisol- and hCG-release in vitro. Conclusions: Progesterone is a marker for differentiation of trophoblasts in syncytiotrophoblasts. Only hAFT stimulates the progesterone production. We suggest, that hAFT can modulate the endocrine function of trophoblast cells in culture by regulating progesterone production.

MeSH

D4.808.745.745.654.829 progesteroneG8.520.769 pregnancy

Schlüsselwörter

Transferrin - Progesteronproduktion - Trophoblastzellen

Key words

Transferrin - progesterone production - trophoblast cell culture

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