Immunological and Biological Activity of Different Commercial Preparations of Human Chorionic Gonadotropin

Abstract

In vitro immunological and biological activity of four commercially available preparations of human chorionic gonadotropin (hCG) for clinical use (Predalon®: hCG-A, Primogonyl®: hCG-B, Choragon®: hCG-C and Pregnisin®: hCG-D) were examined. The methods used include immunoassay, cAMP production in Chinese hamster ovary (CHO) cells and structural analysis of hCG with high performance liquid chromatography (HPLC). There were remarkable differences in immunological activities among preparations. hCG-D had the highest concentration of free hCGβ. In CHO cells, production of cAMP with hCG-C was significantly higher than that with other preparations. Analyses in HPLC showed similar pattern in hCG-C and a standard preparation of hCG (CR 123). The highest immunological activity in hCG-A could be attributed to the presence of nicked form of hCG in this preparation. Various hCG components in preparation may explain these differences.

Zusammenfassung

Vier für den klinischen Einsatz kommerziell erhältliche Human-Choriongonadotropin(hCG)-Präparate (Predalon®: hCG-A, Primogonyl®: hCG-B, Choragon®: hCG-C und Pregnisin®: hCG-D) wurden in vitro sowohl auf ihre immunologische als auch biologische Aktivität untersucht. An Methoden wurden dabei eingesetzt: verschiedene Immunoassays, die Messung der cAMP-Antwort in Chinesischen Hamster Ovar (CHO) Zellen und zur Strukturanalyse eine High Performance Liquid Chromatography (HPLC). Die Präparate ließen große Unterschiede in ihren immunologischen Aktivitäten erkennen. HCG-D wies dabei die höchste Konzentration an freiem hCGβ auf. HCG-C zeigte die signifikant stärkste biologische Aktivität, gemessen an der in CHO-Zellen induzierten cAMP-Produktion. HCG-C erwies sich strukturell bei der HPLC-Analyse als der Standardpräparation (hCG CR123) ähnlich. Die Anwesenheit von sog. „nicked” hCG-Formen in der hCG-A Präparation konnte mit der höchsten immunologischen Aktivität in Beziehung gesetzt werden. Die unterschiedliche Zusammensetzung von kommerziell verfügbaren hCG-Präparaten mit Auftreten von Variantformen des hCG-Moleküls führt offensichtlich zu Unterschieden in der immunologischen und biologischen Aktivität der Substanzen, die auch für den Kliniker bedeutsam sein könnten.

hCG - Commercial preparation - CHO cells - HPLC

HCG - Kommerzielle Präparate - CHO-Zellen - HPLC

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