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DOI: 10.1055/s-2004-829280
Dextran verhindert die durch Mekonium hervorgerufenen morphologischen und biophysikalischen Veränderungen von exogenem Surfactant
Einleitung: Die Inaktivierung von pulmonalem Surfactant spielt eine entscheidene Rolle in der Pathophysiologie des Mekoniumaspirationssyndroms. Nichtionische Polymere (z.B. Dextran) können die Surfactantinhibition aufheben. Die Interaktionen zwischen Surfactant, Mekonium und Dextran sind bisher ungeklärt. Ultrastrukturell kann Surfactant mittels Transmissionselektronenmikroskopie (TEM) in biophysikalisch aktive lamellarkörperähnliche (LBL) und multilamelläre (MV) Formen sowie in inaktive unilamelläre Vesikel (UV) unterteilt werden. Diese Studie sollte die morphologischen Strukturen des modifizierten natürlichen Surfactants Curosurf(R) nach Inkubation mit Mekonium und/oder Dextran mittels TEM in Korrelation zur biophysikalischen Aktivität untersuchen.
Methoden: Mekonium von 16 reifen gesunden Neugeborenen wurde gepoolt, lyophilisiert, und in NaCl 0,9%, mit 1,5mmol/L CaCl2 resuspendiert. Die Mekoniumsuspensionen, Curosurf® und Dextran (Dextran T500, Pharmacia LKB, Uppsala, Schweden) wurden so verdünnt, dass Endkonzentrationen von 2,5 mg/ml Surfactantphospholipiden, 0, 0,02 oder 0,3 mg/ml Mekonium und 0, 5 oder 10 mg/ml Dextran erreicht wurden. Die biophysikalische Aktivität der Proben wurde in einem Pulsating Bubble Surfactometer mittels alternierender Verkleinerung der Oberfläche einer Luftblase um 50% gemessen. Wir bestimmten die Oberflächenspannung bei minimaler Blasengröße (G-min) nach 5min Pulsation bei 37° C und einer Frequenz von 20/min. Für die TEM-Analyse wurden von den Proben nach Fixierung Ultradünnschitte angefertigt, in denen mithilfe stereologischer Methoden die Surfactantsubtypen LBL, MV und UV bestimmt und gezählt wurden. Nach 100–200 Einzelbestimmungen wurde der UV/(LBL+MV)-Quotient berechnet.
Ergebnisse:
Probe |
UV/(LBL+MV) |
G-min [mN/m] |
Curosurf(R) |
0,37 |
2,5±0,3 |
+Mekonium 0,3mg/ml |
0,65 |
22,1±1,6 |
+Mekonium 0,3mg/ml +Dextran 10mg/ml |
0,38 |
4,5±4,6 |
G-min und der relative Anteil inaktiver, unilamellärer Strukturen nehmen parallel nach Inkubation mit Mekonium zu und nach Zugabe von Dextran erneut ab.
Schlussfolgerung: Dextran kann neben der Aufhebung der biophysikalischen Inaktivierung auch die ultrastrukturelle Surfactant-Morphologie wiederherstellen.