Steuerung einer Krebsgentherapie über strahleninduzierbare Promotoren. Ein neuer Ansatz zur kombinierten Radiochemo- und Gentherapie des Zervixkarzinoms

Einleitung: Eine konditional onkolytische Virotherapy (CRVT) ist ein neuartiger Ansatz in der Behandlung maligner Tumore. Die Wirkungsweise besteht in der gezielten Infektion und Onkolyse der Tumorzellen. Eine Möglichkeit die Replikation der Viren auf die Zielzellen zu beschränken ist der Einsatz tumorspezifischer Promotoren (TSP). Zur Behandlung des fortgeschrittenen oder rezidivierten Zervixkarzinoms wird in vielen Fällen eine Radiochemotherapie mit Cisplatin eingesetzt. Von besonderem Nutzen wäre daher ein Promotor welcher durch eine Radio- oder Radiochemotherapie induziert wird. Ein potentiell geeigneter TSP ist der Survivin Promotor. Das korrespondierende Gen wird in Zervixkarzinomzellen, nicht aber in gesundem Gewebe exprimiert.

Material und Methoden: Die Untersuchung der Expression des Survivin Gens erfolgte mittels quantitativer RT-PCR in Zervixkarzinomzellinien, Zervixkarzinomzellen von Patientinnen und normalen Fibroblasten nach Radiatio mit 4 Gy bzw. Radiochemotherapie mit Cisplatin oder ohne Vorbehandlung. Zur Untersuchung der Promotoraktivität wurde ein Ad Vector (AdSurvivinluc) konstruiert. Dieser exprimiert Luziferase als Reportergen unter der transkriptionalen Kontrolle des Survivin Promotors. Zur Kontrolle diente ein Ad Vector, welcher den ubiquitär exprimierten CMV Promotor (AdCMVluc) enthält. Die Infektion erfolgte ohne Vorbehandlung, sowie in Kombination mit Radiatio-, Chemotherapie und Radiochemotherapie mit Cisplatin.

Ergebnisse: In allen untersuchten Zervixkarzinomzellinien und primären Zellen von Patientinnen zeigte sich nach der Radiatio- oder Radiochemotherapie eine signifikant erhöhte Genexpression (8–15 fach (p<0.05) im Vergleich zur Kontrollgruppe. In normalen Kontrollzellen zeigte sich hingegen keine Veränderung der Survivin-Genexpression. AdSurvivinluc zeigte eine hohe Expression in den untersuchten Zervixkarzinomzellen von Patientinnen (4,5–9% im Vergleich zu CMV) im Vergleich zu normalen Kontrollzellen. Die Promotoraktivität konnte durch eine zusätzliche Radiatio oder Radiochemotherapie mit Cisplatin signifikant (p<0.05) gesteigert werden.

Zusammenfassung: Der Survivin Promotor ist gut geeignet zur Steuerung einer CRVT im Rahmen einer kombinierten Radiochemo- und Gentherapie. Neben den synergistischen Effekten führt die selektive Induktion des Promotors zu einer verbesserten Effektivität und Spezifität.