Zytogenetische Analyse von Zygoten mit drei Vorkernen nach In-vitro-Fertilisation: ein Modell zur Beurteilung chromosomaler Aberrationen in menschlichen Keimzellen?

Zusammenfassung

Der Versuch einer zytogenetischen Analyse wurde an 33 nach In-vitro-Insemination entstandenen Zygoten mit je drei Vorkernen unternommen. In 25 Fällen konnten vollständige Karyotypen erstellt werden, wobei die Anordnung der Chromosomen Berücksichtigung fand. Sieben Zygoten wiesen drei getrennte Metaphasen auf (Verteilung n/n/n). Ein haploider neben einem diploiden Chromosomensatz (n/2n) wurde zehnmal, eine Vermischung aller Chromosomen (3n) bei 8 Zellen festgestellt. Das Verhältnis der Geschlechtschromosomen XXX:XXY:XYY betrug 6:7:12.Chromosomale Veränderungen wurden in 5 Zygoten gefunden: zwei numerische Aberrationen, einmal in Begleitung eines Fragments, sowie drei Chromosomenbrüche, in einem Fall begleitet von Fragmenten. Die Ergebnisse deuten an, daß triploide Zygoten Gelegenheit zur zytogenetischen Beurteilung von Keimzellen bieten, welche in vitro zur Fertilisation befähigt sind. Eine klare Trennung der Metaphasen ist jedoch nicht stets zu erreichen und die väterliche Herkunft eines Pronukleus ist nur bei Vorliegen eines Y-Chromosoms eindeutig. Zur Vergrößerung der Zahl individuell auswertbarer Vorkerne sind somit umfangreichere Studien erforderlich. Diese erscheinen sinnvoll, weil wichtige Aussagen über Art und Häufigkeit chromosomaler Anomalien im Anfangsstadium der Konzeption gewonnen werden können.

Abstract

A Model for Assessing Chromosomal Abnormalities in Human Gametes? We attempted to analyse the chromosome constitution of 33 tripronuclear zygotes obtained from our in vitro fertilisatin (IVF) programme. Complete karyotypes could be established for 25 cells, taking the varying arrangement of the chromosome sets into consideration. Seven zygotes showed three separated haploid metaphases (distribution pattern n/n/n) whereas ten zygotes had one haploid and one diploid chromosome set (n/2n). In eight cells the individual sets were not distinguishable (3n). The sex chromosome ratio XXX:XXY:XYY was 6:7:12.Chromosome abnormalities were found in five zygotes, including two numerical alterations (one accompanied by an acentric fragment), and three chromosome breaks (in one case accompanied by two fragments). The results suggest that triploid zygotes offer the opportunity to study the chromosome constitution of human gametes which can undergo fertilisation in vitro. However, a clear separation of the three chromosome sets cannot always be achieved and the paternal origin of a pronucleus can only be determined by the presence of a Y-chromosome. Therefore, long-term studies will be necessary to increase the number of individually analysable pronuclei. This effort appears useful because important information on the kind and frequency of chromosomal abnormalities during the earliest stages of conception will be provided.