Zusammenfassung
Hintergrund: In-vivo-Tierexperimente haben belegt, dass dem Zytoskelett einer Zelle bei den strukturellen
Veränderungen nach einer induzierten Netzhautablösung eine wichtige Funktion zukommt.
In der vorliegenden Untersuchung soll geklärt werden, ob eine Retina-Organkultur als
In-vitro-Modell für eine Netzhautablösung dienen kann und somit eine sinnvolle Ergänzung
zu Tierversuchen darstellt. Das Hauptaugenmerk liegt hierbei auf den frühen zytoskelettalen
Veränderungen nach der Netzhautablösung. Material und Methoden: Die Netzhäute von enukleierten Schweineaugen wurden auf speziellen Trägern für ein
bis zwei Wochen kultiviert und anschließend immunhistochemisch (Vimentin, GFAP, alpha-Tubulin)
sowie elektronenmikroskopisch untersucht. Ergebnisse: Die Ergebnisse belegen, dass die räumlichen und zeitlichen Reaktionen der untersuchten
zytoskelettalen Veränderungen in vitro und in vivo vergleichbare Muster aufweisen.
Neben den Intermediärfilamenten spielen vermutlich die Mikrotubuli, in der frühen
Phase einer Gliose, d. h. bevor sich einzelne Müllerzellausläufer invasiv in den subretinalen
Raum ausbreiten, eine wichtigere Rolle als bisher angenommen. Schlussfolgerungen: Mit dem vorgestellten Organkultur-Modell sollen zukünftig die bislang noch weitestgehend
unverstandenen frühen Reaktionen einer retinalen Gliose, welche bereits mit subzellulären
Veränderungen an der äußeren limitierenden Membran beginnen, untersucht werden. Das
intrazelluläre Transportsystem der Mikrotubuli könnte bei den beschriebenen Prozessen
eine wichtige Schlüsselfunktion einnehmen.
Abstract
Background: In vivo animal experiments have shown that the cytoskeleton plays a crucial role
in case of structural changes after an induced retinal detachment. This study attempts
to clarify whether a retinal organ culture could serve as an in vitro model for retinal
detachment and thus represent an alternative to animal experiments. The main focus
of this publication lies on the early cytoskeletal changes after retinal detachment.
Materials and Methods: Porcine retinas were mounted on special carriers, cultured for one or two weeks and
examined by standard immunohistological (vimentin, GFAP, alpha-tubulin), as well as
electron microscopical procedures. Results: The cytoskeletal changes revealed similar spatio-temporal pattern compared with in
vivo induced retinal detachments. In addition, it was shown that microtubules might
play a crucial role in the early phase of gliosis, i. e., prior to a subretinal invasion
by Müller cell extensions. Conclusions: The presented organ culture model will be used to unravel the largely unknown initial
reactions of retinal gliosis, focusing on subcellular changes localised at the outer
limiting membrane. The intracellular transport system of microtubules might play a
key role in these processes.
Schlüsselwörter
Organkultur - Retina - Mikrotubuli - GFAP - Vimentin - Zytoskelett
Key words
organ culture - retina - microtubules - GFAP - vimentin - cytoskeleton
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Dr. Jörg Winkler
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