Regulation des Endothelinsystems durch microRNAs in humanen Mammakarzinomzellen

Ziel der Arbeit ist die Klärung der Bedeutung ausgewählter miRNAs für die Expressionsregulation des Endothelinsystems und die Untersuchung der funktionellen Auswirkungen einer veränderten miRNA-Expression in der humanen Mammakarzinomzelllinie MDA-MB-468. Bei den untersuchten miRNAs handelt es sich um miR-1, miR-200b und miR-218. MDA-MB-468-Zellen wurden mit Kontroll-miRNA, miR-1, miR-200b oder miR-218 transfiziert. Anschließend wurden die transfizierten MDA-MB-468-Zellen Genexpressionsanalysen, verschiedenen Analysen auf Proteinebene sowie funktionalen Assays (Invasions-, Migrations- und Proliferations-Assay) unterzogen. Resultate von mit miRNA transfizierten Zellen wurden mit denen von Negativkontrollzellen verglichen. miR-1 hat sowohl auf Gen- als auch auf Proteinebene unterschiedliche Effekte gezeigt. Während ETAR und ETBR bei Überexpression von miR-1 herunterreguliert wurden, kam es zu einer Hochregulation von ET-1. Die miR-200b-Überexpression war auf Genebene mit einem ähnlichen Effekt wie bei miR-1 assoziiert, wohingegen eine Überexpression von miR-218 tendenziell für eine Herunterregulation aller drei untersuchten Endothelinkomponenten verantwortlich war. Anschließende funktionale Studien haben gezeigt, dass alle drei miRNAs als Tumorsuppressoren wirken können: sowohl Proliferation, Migration und Invasion wurden nach der Überexpression aller miRNAs vermindert. In dieser Arbeit wurde gezeigt, dass in Mammakarzinomzellen die drei miRNAs in unterschiedlicher Weise das Endothelinsystem regulieren können, und gleichzeitig phänotypische Eigenschaften der Krebszellen beeinflussen können. Die phänotypische Beeinflussung durch miRNA-Überexpression könnte teilweise mit einer Veränderung der Regulation des Endothelinsystems durch die untersuchten miRNAs erklärt werden. Insgesamt stehen die beobachteten Effekte auf den Zellphänotyp gut im Einklang mit dem Einfluss der Endothelin-Achse auf die Zellproliferation-, migration und -invasion. Die Ergebnisse der vorliegenden Arbeit könnten als Basis für die Entwicklung zukünftiger miRNA-basierender molekularen und zielgerichteten Therapien beim Mammakarzinom dienen.