Untersuchung zur Stabilität von kaninen Liquorproben in Bezug auf Zellzahl und Zellpopulationen in „TransFIX^®/EDTA CSF Sample Storage Tubes“

Ziel und Methodik Aufgrund des niedrigen Eiweißgehalts des Liquor cerebrospinalis (CSF) degenerieren Leukozyten relativ rasch. Eine Untersuchung wird daher direkt nach der Probenentnahme empfohlen. Um den Einfluss von „TransFix^®/EDTA CSF Sample Storage Tubes“ (TransFix^®-Röhrchen; Cytomark, Großbritannien) auf die Zellzahl und -populationen in gelagerten kaninen CSF-Proben zu evaluieren, wurden mit Blutzellen gespikte Liquorpoolproben (n = 11) am Entnahmetag der Blutzellen sowie über drei weitere Tage vergleichend für die native und die Lagerung in TransFix^®-Röhrchen mittels Durchflusszytometrie untersucht. Des Weiteren wurden frische CSF-Proben (n = 24) innerhalb von 30 Minuten sowie an Tag 1 und 3 nach Entnahme ebenfalls vergleichend für beide Lagermethoden mittels mikroskopischer Zellzählung und morphologischer Beurteilung der Zellen untersucht.
Ergebnisse Nach Lagerung in TransFix^®-Röhrchen konnten die Leukozyten unzureichend mit Türkʼscher Lösung gefärbt werden, eine Differenzierung zwischen Erythrozyten und Leukozyten war schwierig. Die Zellpopulationen ließen sich bei Beurteilung der Zytospinpräparate ebenfalls schlecht unterscheiden, da die Leukozyten kleiner und die Zellkerne undeutlich zu erkennen waren. Durchflusszytometrisch war im Vergleich zu den nativ gelagerten Proben bei in TransFix^®-Röhrchen gelagerten Proben über den gesamten Untersuchungszeitraum eine deutlich höhere Zellzahl zu messen. Die Antikörper (AK) gegen CD3, CD4 und CD21 als Lymphozytenmarker, gegen CD11b als Granulozytenmarker und gegen CD45 als Panleukozytenmarker zeigten eine gute Bindungsstärke und ermöglichten somit eine gute Differenzierung der Zellpopulationen. Monozyten waren jedoch nach der Lagerung in den TransFix^® Röhrchen nicht mehr über den AK gegen CD14 nachweisbar.
Schlussfolgerung Aufgrund dieser Ergebnisse können TransFix^®-Röhrchen für eine längere Lagerung vor einer durchflusszytometrischen Untersuchung von Lymphozyten in CSF-Proben genutzt werden. Standarduntersuchungen, wie Zellzählung und morphologische Zellbeurteilung, sollten allerdings weiterhin an frischen CSF-Proben durchgeführt werden.