Bildung von Stress-Granules in der HEI-OC1 auditorischen Zelllinie und das Corti-Organ

Einführung Stress-Granules (SG) sind membranlose zytoplasmatische Ansammlungen, die sich in Zellen als Reaktion auf Stress bilden. SG werden hauptsächlich durch untranslatierte mRNA und RNA-bindende Proteine gebildet, und deren Formation gilt als ein wichtiger Selbstschutzmechanismus. Studien deuten darauf hin, dass der stressbedingte RNA-Stoffwechsel eine wichtige Rolle bei neurodegenerativen Erkrankungen spielt, was die Relevanz dieses Mechanismus beim Erforschen der Ototoxitität sowie der cochleärer Neurodegeneration unterstreicht.

Material und Methoden 5 Tag alte Corti-Organe (OC) von Wildtyp-C57BL/6J-Mäusen, die auditorische Zelllinie House Ear Institute–Corti-Organ 1 (HEI-OC1), sowie zwei Zelllinien nicht-cochleären Ursprungs [humane embryonische Niere 293 (HEK293); humanes Neuroglioma H4 (H4)] wurden für Experimente verwendet. OCs und Zelllinien wurden mit dem stressinduzierenden Mittel Natriumarsenit (NA), inkubiert und mit Gentamicin verglichen. Wir analysierten die SG-Formation (SGF) mittels Immunzytochemie, Immunhistochemie und Western Blot.

Resultate NA induzierte eine SGF im OC nach einer 90-min-Inkubationszeit mit NA 500μM. Bei den Zelllinien HEI-OC1, HEK293 und H4, eine SGF konnte nach 30 min NA 500μM characterisiert werden. Gentamicin generierte eine SGF im OCs und HEI-OC1-Zellen nach einer jeweiligen Inkubation mit 500μM und 200μM nach 24 Stunden. HEK293- und H4-Zellen wiesen keine Gentamicin-assoziierte SGF auf.

Schlussfolgerung Die Bildung von SG konnte im OC sowie in HEI-OC1-Zellen bei der Inkubation mit NA und Gentamicin charakterisiert werden. Zelllinien nicht-cochleären Ursprungs zeigten eine SGF nur bei Inkubation mit NA. Ermittelte Daten zeigen wichtige Erkenntnisse zur Ototoxizität und SGF im Innenohr.

Interessenkonflikt

Der Erstautor gibt keinen Interessenskonflikt an.

Publication History

Article published online:
13 May 2021