Die Kombination von Temozolomid mit dem Flechteninhaltsstoff Everninsäure reguliert den WNT-Signalweg in der Glioblastoma Zelllinie U-87

A Shcherbakova; L Nyugen; A Koptina; E Romanov; G Ulrich-Merzenich

doi:10.1055/s-0041-1731510

Zeitschrift für Phytotherapie, Table of Contents

Zeitschrift für Phytotherapie 2021; 42(S 01): S24-S25
DOI: 10.1055/s-0041-1731510

Poster

Die Kombination von Temozolomid mit dem Flechteninhaltsstoff Everninsäure reguliert den WNT-Signalweg in der Glioblastoma Zelllinie U-87

A Shcherbakova

¹Medical Clinic III, AG Synergy Research and Experimental Medicine, University Hospital (UKB), Bonn University, Germany

²Institute of Forestry and Nature Management, Volga State University of Technology, Russian Federation

,

L Nyugen

¹Medical Clinic III, AG Synergy Research and Experimental Medicine, University Hospital (UKB), Bonn University, Germany

³Division of Pharmacognosy, Department of Medicinal Chemistry, Uppsala University, Sweden

,

A Koptina

²Institute of Forestry and Nature Management, Volga State University of Technology, Russian Federation

,

E Romanov

²Institute of Forestry and Nature Management, Volga State University of Technology, Russian Federation

,

G Ulrich-Merzenich

¹Medical Clinic III, AG Synergy Research and Experimental Medicine, University Hospital (UKB), Bonn University, Germany

› Author Affiliations

Abstract

Full Text

Hintergrund Das Glioblastom (GBM) ist einer der heterogensten Tumore und weist ein hoch aggressives Verhalten mit häufigen Resistenzentwicklungen gegen medikamentöse Behandlungen auf. Die GBM-Zelllinie U87 gilt als sensibel bezüglich des alkylierenden Zytostatikums Temozolomid (TMZ) bei IC₅₀-Werten unter 500 µM. Bei einer resistenten U87 Zelllinie (IC₅₀ für TMZ: 593 µM) konnten wir zeigen, dass die Everninsäure (EA), ein zentraler Inhaltsstoff der Flechte Evernia prunastri L., die Proliferation der U87-Zellen inhibiert (IC₅₀: 61 µM) [1].

Methodik Wir untersuchten die Rolle der WNT-Signalkaskade in der antiproliferativen Wirkung von EA und TMZ in U87 Zellen – allein und in Kombination. Die sog. WNT-Signalkaskade beeinflusst stark das invasive Potenzial, das Wiederauftreten und die Behandlungsresistenz von Gliom-Stammzellen. Bei Aktivierung der WNT-Signalkaskade bindet dieser an den Zelloberflächen-Rezeptorkomplex „Frizzled“.

U87 Zellen wurden mit TMZ (300–600 µM), EA (20–60 µM) und der Kombination von EA und TMZ (320–620 µM) für 24 h behandelt. Die Genexpression wurde mittels Deep Sequencing untersucht. Gene Ontology und Gene Set Enrichment Analysen wurden durchgeführt. Der WNT Inhibitor Factor 1 (WIF1) wurde mittels ELISA untersucht.

Ergebnisse Die Kombinationsbehandlung mit TMZ (320 µM) und EA (35 µM) (TMZ320EA35) führte zu einer Herunterregulierung von WNT 5A (0,6-fach (f)) (p=0,04). WNT 3 wurde durch EA (45 µM) erhöht (28,9 f (p=0,04)); Frizzled-7 (FZD7) wurde nach Stimulierung mit der Kombination (0,41–0,51, p=0,04) herunterreguliert und nicht durch die Einzelkomponenten beeinflusst. Im Überstand wurde WIF1 nur signifikant durch Kombinationen von TMZ und EA beeinflusst (TMZ320EA35: 10,5f, TMZ380EA25: 3,2f, TMZ380EA35: 4,1f; TMZ500EA25: 3,05f, TMZ580EA20: 4,4f, TMZ580EA25: 5,4f). Die Effektstärke war abhängig vom Konzentrationsverhältnis TMZ – EA. Die Kombination von TMZ mit dem Naturstoff EA kann in vitro die Resistenz von U87 Glioblastomzellen durch die Inhibierung der WNT-Signalkaskade aufheben.

Danksagung A. Shcherbakova wurde durch ein Langzeitstipendium (2014/2015) und ein Kurzzeitstipendium (2019) des DAAD unterstützt.

References

Literatur
1 Shcherbakova A. et al. Oncol Res Treat 2019; 42 (Suppl 4): 275-276: P97