Durchflußzytometrische Liquorzelldiagnostik

Summary

Flow cytometry is an established method to study subpopulations of cells in suspensions. Immunostaining with fluorescein or phycoerythrin-labelled monoclonal antibodies allows simultaneous and reproducible quantification of up to four parameters: cell size, cell granularity and, depending on the monoclonal antibodies bound, two cell surface properties. In recent years, this method had been successfully applied to fluids containing large numbers of cells such as blood. We adapted this method to the special properties of the cerebrospinal fluid (CSF), which contains only small amounts of highly vulnerable cells. The normal range of functionally distinct subsets of lymphocytes of the CSF and their alterations in inflammatory diseases of the central nervous system were determined. The method is also able to detect malignant cells in the CSF.

Zusammenfassung

Die Durchflußzytometrie ist eine besonders geeignete Methode für die quantitative Analyse von Subpopulationen in Zellsuspensionen: Nach einer Immunfluoreszenzfärbung mit Fluoreszein-Isothiozyanat (FITC)- oder Phycoerythrin (PE)-markierten monoklonalen Antikörper (MAK) sind im Durchflußzytometer bis zu vier Parameter simultan meßbar. Diese geben Auskunft über die Zellgröße, Zellgranularität und, mittels der gebundenen MAK, über zwei zusätzliche OberfLächeneigenschaften. Bislang wurde diese Methode mit großem Erfolg für zellreiche Flüssigkeiten wie z.B. Blut angewandt. Wir haben die Methode an die Besonderheiten des Liquor cerebrospinalis angepaßt, der nur wenige Zellen hoher Vulnerabilität enthält. In der vorliegenden Arbeit stellen wir die Normwerte einzelner funktionell verschiedener Subpopulationen von Liquorlymphozyten und ihre Veränderungen bei entzündlichen Erkrankungen des zentralen Nervensystems vor. Darüber hinaus zeigen wir, wie mit dieser Methode maligne Zellen im Liquor cerebrospinalis eines Patienten mit einem Glioblastom nachgewiesen werden konnten.