Immunohistochemistry of Markers of the Enteric Nervous System in Whole-Mount Preparations of the Human Colon

Abstract

In this study we tested the immunohistochemical reactions of various markers for the enteric nervous system in whole-mount preparations of the human colon. For that purpose we used polyclonal antibodies against the neuronal markers - protein gene product 9.5 (PGP), neuron-specific enolase (NSE), neurofilament protein 200 (NFP), microtubule-associated proteins (MAPs); and the glial markers - S-100 protein and glial fibrillary acidic protein (GFAP) for the immunoperoxidase reaction. Whole-mount preparations are more suitable for histopathological evaluation and interpretation than sections, because the enteric nervous system consists of three-dimensional plexuses lying within the layers of the intestinal wall. Sections show only a part of the plexuses, neurons and glial cells. On the other hand, whole-mount preparations reveal the morphology of the plexuses as a whole. Among the neuronal and glial markers used, S-100 protein, the neurofilament protein, and the protein gene product 9.5 (PGP) produced the best results. Furthermore, this developing method provides new possibilities for the histopathological analysis of defects in the enteric nervous system, such as neuronal intestinal dysplasia (NID).

Zusammenfassung

In dieser Studie wurde die immunhistochemische Reaktion verschiedener Marker des enterischen Nervensystems in Häutchenpräparaten des menschlichen Dickdarms getestet. Dabei benutzten wir polyklonale Antikörper gegen die neuronalen Marker Protein Gene Product 9.5 (PGP), neuronenspezifische Enolase (NSE), Neurofilament Protein 200 (NFP), Microtubule-Associated Proteins (MAPs) und die glialen Marker S-100-Protein und fibrilläres saures Gliaprotein für eine Immunperoxidasereaktion. Im Vergleich zu Schnittpräparaten bieten Häutchenpräparate bessere Möglichkeiten für die histopathologische Untersuchung. Da das enterische Nervensystem aus dreidimensionalen Nervengeflechten in den verschiedenen Schichten der Darmwand besteht, können Schnittpräparate die Morphologie der Plexus, der Nerven- und Gliazellen nur teilweise wiedergeben. Dagegen geben Häutchenpräparate die Morphologie des enterischen Nervensystems in ihrer Gesamtheit wieder. Unter den verwendeten Markern konnten insbesondere mit S-100 Protein, Neurofilament-Protein und Protein Gene Product 9.5 ausgezeichnete Ergebnisse in der Darstellung des enterischen Nervensystems erzielt werden. Diese Methode ergibt neue Möglichkeiten in der histopathologischen Analyse von Innervationsstörungen des Magen-Darm-Kanals, wie z. B. der neuronalen intestinalen Dysplasie (NID).

Key words

Immunohistochemistry - Enteric nervous system - Colon - Myenteric plexus - Submucosal plexuses

Schlüsselwörter

Immunhistochemie - Enterisches Nervensystem - Dickdarm - Plexus myentericus - Plexus submucosus