Download PDF
Tierarztl Prax Ausg K Kleintiere Heimtiere 2003; 31(01): 60-66
DOI: 10.1055/s-0037-1622111
Labor
Schattauer GmbH

Sensitivität und Spezifität der CDV-RT-PCR zur Diagnose der kaninen Staupe[*]

Sensitivity and specificity of CDV RT-PCR in the diagnosis of canine distemper
A. Moritz
1   Aus der Medizinischen und Gerichtlichen Veterinärklinik I, Innere Krankheiten der Kleintiere (Prof. Dr. E.-G. Grünbaum), Innere Medizin der Kleintiere und klinische Laboratoriumsdiagnostik (HDoz. Dr. A. Moritz) der Justus-Liebig-Universität Gießen, dem
,
W. Baumgärtner
2   Institut für Pathologie (Prof. Dr. W. Baumgärtner Ph.D.) der Tierärztlichen Hochschule Hannover und dem
,
Anna-Lena Frisk
2   Institut für Pathologie (Prof. Dr. W. Baumgärtner Ph.D.) der Tierärztlichen Hochschule Hannover und dem
,
M. König
3   Institut für Virologie (Prof. Dr. H.-J. Thiel) der Justus-Liebig-Universität Gießen
› Author Affiliations
Further Information

Publication History

Publication Date:
04 January 2018 (online)

Also available at
    Permissions and Reprints

Zusammenfassung

Die Diagnostik bei Hunden mit Staupeverdacht stützt sich in der Regel auf die Anamnese und die Kombination spezifischer klinischer Befunde. Das Ziel der vorliegenden Studie war die Beurteilung der klinisch relevanten Sensitivität und Spezifität des Nachweises von Nukleinsäure des kaninen Staupevirus (CDV) mittels Reverse-Transkriptase-Polymerasekettenreaktion (CDV-RT-PCR) zur In-vivo-Diagnostik der kaninen Staupe. Zur Auswertung kamen 53 (48,6%) männliche und 56 (51,4%) weibliche Hunde im durchschnittlichen Alter von 1,25 Jahren. Bei 61 Tieren (56%) wurde wegen zentralnervöser, bei 38 (35%) wegen katarrhalischer Symptome und bei 10 (9%) Patienten wegen schwerer Allgemeinstörung mit zunächst ungeklärtem Fieber die Staupe-RT-PCR im Vollblut, Liquor, Urin oder Serum eingeleitet. Der positive bzw. negative Nachweis von Nukleinsäure des kaninen Staupevirus wurde dann in Bezug zu den Ergebnissen der klinischen, der weiterführenden bildgebenden und labordiagnostischen Untersuchungen sowie zum weiteren Krankheitsverlauf, im Todesfall zum Ergebnis der pathologisch-anatomischen bzw. histopathologischen Untersuchung als »klinisch« richtig (richtig positiv oder negativ) oder falsch (falsch positiv oder negativ) bewertet. Bei 15 Hunden war das CDV-RT-PCR-Ergebnis richtig positiv, bei 87 richtig negativ, bei 7 falsch positiv und bei keinem Tier falsch negativ. Hieraus lassen sich für die klinische Diagnostik der kaninen Staupeerkrankung mittels CDV-RT-PCR eine Sensitivität von 100% (81,9-100%), eine Spezifität von 92% (85,3-97,0%), ein positiver prädiktiver Wert von 68% (45,1-86,1%) sowie ein negativer prädiktiver Wert von 100% (96,6-100%) berechnen. Die diagnostische Effizienz des Testes liegt bei 93% (87,2-97,6%). Die Staupe-RT-PCR ist somit derzeit das Nachweisverfahren der Wahl zur ätiologischen Diagnose einer kaninen Staupeerkrankung. Ein negatives Ergebnis schließt die Staupe mit hoher Sicherheit aus, ein positives Resultat muss aber immer in Bezug zum klinischen Bild des Patienten interpretiert werden und im Zweifelsfall sollte der Test nach ca. 14 Tagen wiederholt werden.

Summary

The diagnosis of canine distemper is mostly based on history, physical examination and the combination of specific clinical signs. Because of the great variety of clinical signs (catarrhalic, nervous and systemic form as well as special forms), the mostly endemic outbreaks, an etiological diagnosis is needed. In the presented study the clinical relevant sensitivity and specificity of the detection of viral nuclear acid of canine distemper virus with a reverse transcriptase-polymerase chain reaction technique (CDV RT-PCR) was evaluated using blood, cerebrospinal fluid, urine or serum of 109 dogs. 53 (48.6%) of them were male, and 56 (51.4%) female with a median age of 1.25 years (range: 8 weeks to 13.0 years). In 61 animals (56%) central nervous signs and in 38 (35%) catarrhalic signs were observed. 10 (9%) dogs showed a severe generalized disease with fever. Positive and negative results of the CDV RT-PCR were judged in comparison to clinical diagnosis. In 15 cases CDV RT-PCR result was considered to be correct positive, in 87 cases correct negative, in 7 false positive and in no case false negative. In conclusion of the study, a sensitivity of 100% (81.9-100%), a specificity of 92% (85.3-97.0%), a positive predictive value of 68% (45.1-86.1%) and a negative predictive value of 100% (96.6-100%) for the clinical diagnosis of canine distemper using CDV RT-PCR can be calculated. The diagnostic efficiency is 93% (87.2-97.6%). Therefore CDV RT-PCR is at the moment the method of choice for the etiological diagnosis of canine distemper. Negative results are reliable, positive results have to be verified clinically or by repeating the test within about 14 days.

Schlüsselwörter

Staupevirusinfektion - Hund - Reverse-Transkriptase-Polymerasekettenreaktion - Morbillivirus - Paramyxoviridae

Key words

Distemper virus infection - Dog - Reverse transcriptasepolymerase chain reaction - Morbillivirus - Paramyxoviridae

* Herrn Prof. Dr. Ernst-Günther Grünbaum und Herrn Prof. Dr. Ernst Schimke aus Anlass ihrer Verabschiedung in den Ruhestand gewidmet.


 

  • Literatur

  • 1 Adelus-Neveu F, Saint-Gérand AL, Favet G, Wiedemann C. Hundestaupe: Lehren aus einer Epizootie in Frankreich. Prakt Tierarzt 1991; 72: 866-71.
    PubMedGoogle Scholar
  • 2 Barrett T. Morbillivirus infections, with special emphasis on morbilliviruses of carnivores. Vet Microbiol 1999; 69: 3-13.
    CrossrefPubMedGoogle Scholar
  • 3 Barrett T, Crowther J, Osterhaus AD, Subbarao SM, Groen J, Haas L, Mamaev LV, Titenko AM, Visser IK, Bostock CJ. Molecular and serological studies on the recent seal virus epizootics in Europe and Siberia. Sci Total Environ 1992; 115: 117-32.
    CrossrefPubMedGoogle Scholar
  • 4 Baumgaertner W. Virale Infektionskrankheiten bei Junghunden. Prakt Tierarzt 1993; 01: 26-32.
    PubMedGoogle Scholar
  • 5 Baumgaertner W, Boyce RW, Alldinger S, Axthelm MK, Weisbrode SE, Krakowka S, Gaedke K. Metaphyseal bone lesions in young dogs with systemic canine distemper virus infection. Vet Microbiol 1995; 44: 201-9.
    CrossrefPubMedGoogle Scholar
  • 6 Baumgaertner W, Boyce RW, Weisbrode SE, Aldinger S, Axthelm MK, Krakowka S. Histologic and immunocytochemical characterization of canine distemper-associated metaphyseal bone lesions in young dogs following experimental infection. Vet Pathol 1995; 32: 702-9.
    CrossrefPubMedGoogle Scholar
  • 7 Carpenter MA, Appel MJ, Roelke-Parker ME, Munson L, Hofer H, East M, O’Brien SJ. Genetic characterization of canine distemper virus in Serengeti carnivores. Vet Immunol Immunopathol 1998; 65: 259-66.
    CrossrefPubMedGoogle Scholar
  • 8 Courtenay O, Quinnell RJ, Chalmers WS. Contact rates between wild and domestic canids: no evidence of parvovirus or canine distemper virus in crab-eating foxes. Vet Microbiol 2001; 81: 9-19.
    CrossrefPubMedGoogle Scholar
  • 9 Deem SL, Spelman LH, Yates RA, Montali RJ. Canine distemper in terrestrial carnivores: a review. J Zoo Wildl Med 2000; 31: 441-51.
    CrossrefPubMedGoogle Scholar
  • 10 Depner K, Harder T, Dubberke M. Prüfung der Effektivität prophylaktischer Impfungen gegen Hundestaupe in einem Tierheim. Kleintierprax 1991; 36: 118-28.
    PubMedGoogle Scholar
  • 11 Driver J. Statistische Untersuchungen zu Abgangsursachen bei Hunden anhand des Sektionsgutes des Institutes für Veterinär-Pathologie der Justus-Liebig-Universität Gießen aus den Jahren 1978-1992. Diss med vet; Justus-Liebig-Universität Gießen: 1997
    Google Scholar
  • 12 Forsyth MA, Kennedy S, Wilson S, Eybatov T, Barrett T. Canine distemper virus in a Caspian seal. Vet Rec 1998; 143: 662-4.
    PubMedGoogle Scholar
  • 13 Freudiger U. Infektionskrankheiten. In: Klinik der Hundekrankheiten. Freudiger U, Grünbaum EG, Schimke E. Hrsg. Stuttgart: Fischer; 1993
    Google Scholar
  • 14 Frisk AL, Konig M, Moritz A, Baumgaertner W. Detection of canine distemper virus nucleoprotein RNA by reverse transcription-PCR using serum, whole blood, and cerebrospinal fluid from dogs with distemper. J Clin Microbiol 1999; 37: 3634-43.
    PubMedGoogle Scholar
  • 15 Froelich K, Czupalla O, Haas L, Hentschke J, Dedek J, Fickel J. Epizootiological investigations of canine distemper virus in free-ranging carnivores from Germany. Vet Microbiol 2000; 74: 283-92.
    CrossrefPubMedGoogle Scholar
  • 16 Gassen U, Collins FM, Duprex WP, Rima BK. Establishment of a rescue system for canine distemper virus. J Virol 2000; 74: 10737-44.
    CrossrefPubMedGoogle Scholar
  • 17 Graber HU, Stettler M, Zurbriggen A. RT-PCR: Ein Hilfsmittel zur Herstellung von Klonen für die Staupeforschung. Schweiz Arch Tierheilkd 1996; 138: 99-103.
    PubMedGoogle Scholar
  • 18 Grone A, Frisk AL, Baumgaertner W. Cytokine mRNA expression in whole blood samples from dogs with natural canine distemper virus infection. Vet Immunol Immunopathol 1998; 65: 11-27.
    CrossrefPubMedGoogle Scholar
  • 19 Haas L, Hofer H, East M, Wohlsein P, Liess B, Barrett T. Canine distemper virus infection in Serengeti spotted hyenas. Vet Microbiol 1996; 49: 147-52.
    CrossrefPubMedGoogle Scholar
  • 20 Haas L, Subbarao SM, Harder T, Liess B, Barrett T. Detection of phocid distemper virus RNA in seal tissues using slot hybridization and the polymerase chain reaction amplification assay: genetic evidence that the virus is distinct from canine distemper virus. J Gen Virol. 1991 72. (Pt 4).
    PubMedGoogle Scholar
  • 21 Harder TC, Kenter M, Appel MJ, Roelke-Parker ME, Barrett T, Osterhaus AD. Phylogenetic evidence of canine distemper virus in Serengeti’s lions. Vaccine 1995; 13: 521-3.
    CrossrefPubMedGoogle Scholar
  • 22 Harder TC, Kuczka M, Martens W, Greiser WI, Maack D, von Messling V, Liess B. Ein Ausbruch von Hundestaupe in einem Tierheim mit vakzinierter Hundepopulation. Kleintierprax 1997; 42: 597-602.
    PubMedGoogle Scholar
  • 23 Helfrich MH, Hobson RP, Grabowski PS, Zurbriggen A, Cosby SL, Dickson GR, Fraser WD, Ooi CG, Selby PL, Crisp AJ, Wallace RG, Kahn S, Ralston SH. A negative search for a paramyxoviral etiology of Paget’s disease of bone: molecular, immunological, and ultrastructural studies in UK patients. J Bone Min Res 2000; 15: 2315-29.
    CrossrefPubMedGoogle Scholar
  • 24 Jauniaux T, Boseret G, Desmecht M, Haelters J, Manteca C, Tavernier J, van Gompel J, Coignoul F. Morbillivirus in common seals stranded on the coasts of Belgium and northern France during summer 1998. Vet Rec 2001; 148: 587-91.
    CrossrefPubMedGoogle Scholar
  • 25 Jensen T, van de Bildt M, Dietz HH, Andersen TH, Hammer AS, Kuiken T, Osterhaus A. Another phocine distemper outbreak in Europe. Science 2002; 297: 209.
    CrossrefPubMedGoogle Scholar
  • 26 Leisewitz AL, Carter A, van Vuuren M, van Blerk L. Canine distemper infections, with special reference to South Africa, with a review of the literature. J S Afr Vet Assoc 2001; 72: 127-36.
    PubMedGoogle Scholar
  • 27 Markus S, Failing K, Baumgaertner W. Increased expression of pro-inflammatory cytokines and lack of up-regulation of anti-inflammatory cytokines in early distemper CNS lesions. J Neuroimmunol 2002; 125: 30-41.
    CrossrefPubMedGoogle Scholar
  • 28 McCaw DL, Thompson M, Tate D, Bonderer A, Chen YJ. Serum distemper virus and parvovirus antibody titers among dogs brought to a veterinary hospital for revaccination. J Am Vet Med Assoc 1998; 213: 72-5.
    PubMedGoogle Scholar
  • 29 Mee A, Bennett D, May C. Canine distemper virus in bone [letter]. Vet Rec 1992; 131: 496.
    PubMedGoogle Scholar
  • 30 Mee AP, Dixon JA, Hoyland JA, Davies M, Selby PL, Mawer EB. Detection of canine distemper virus in 100% of Paget’s disease samples by in situ-reverse transcriptase-polymerase chain reaction. Bone 1998; 23: 171-5.
    CrossrefPubMedGoogle Scholar
  • 31 Moritz A, Frisk AL, Baumgärtner W. Beurteilung diagnostischer Möglichkeiten bei der Staupevirusinfektion des Hundes. Kleintierprax 1998; 43: 153-72.
    PubMedGoogle Scholar
  • 32 Oettel M, Christoph HJ. Der Verlauf der »Biologischen Leukozytenkurve« bei Febris contagiosa canis. Schweiz Arch Tierheilkd 1966; 108: 148.
    PubMedGoogle Scholar
  • 33 Ohashi K, Iwatsuki K, Nakamura K, Mikami T, Kai C. Molecular identification of a recent type of canine distemper virus in Japan by restriction fragment length polymorphism. J Vet Med Sci 1998; 60: 1209-12.
    CrossrefPubMedGoogle Scholar
  • 34 Ooi CG, Walsh CA, Gallagher JA, Fraser WD. Absence of measles virus and canine distemper virus transcripts in long-term bone marrow cultures from patients with Paget’s disease of bone. Bone 2000; 27: 417-21.
    CrossrefPubMedGoogle Scholar
  • 35 Ralston SH, Digiovine FS, Gallacher SJ, Boyle IT, Duff GW. Failure to detect paramyxovirus sequences in Paget’s disease of bone using the polymerase chain reaction. J Bone Min Res 1991; 06: 1243-8.
    PubMedGoogle Scholar
  • 36 Rzezutka A, Mizak B. Application of N-PCR for diagnosis of distemper in dogs and fur animals. Vet Microbiol 2002; 88: 95-103.
    CrossrefPubMedGoogle Scholar
  • 37 Shimizu H, Shimizu C, Burns JC. Detection of novel RNA viruses: morbilliviruses as a model system. Mol Cell Probes 1994; 08: 209-14.
    CrossrefPubMedGoogle Scholar
  • 38 Shin Y, Mori T, Okita M, Gemma T, Kai C, Mikami T. Detection of canine distemper virus nucleocapsid protein gene in canine peripheral blood mononuclear cells by RT-PCR. J Vet Med Sci 1995; 57: 439-45.
    CrossrefPubMedGoogle Scholar
  • 39 Stephensen CB, Welter J, Thaker SR, Taylor J, Tartaglia J, Paoletti E. Canine distemper virus (CDV) infection of ferrets as a model for testing Morbillivirus vaccine strategies. N J Virol 1997; 71: 1506-13.
    PubMedGoogle Scholar
  • 40 Thomas WB. Inflammatory diseases of the central nervous system in dogs. Clin Tech Small Anim Pract 1998; 13: 167-78.
    CrossrefPubMedGoogle Scholar
  • 41 Tipold A, Jaggy A, Zurbriggen A, Vandevelde M. Neurologische Symptome bei Hundestaupe – eine klinische Studie. Wien Tierärztl Mschr 1994; 81: 274-9.
    PubMedGoogle Scholar
  • 42 van-Moll P, Alldinger S, Baumgaertner W, Adami M. Distemper in wild carnivores: an epidemiological, histological and immunocytochemical study. Vet Microbiol 1995; 44: 193-9.
    CrossrefPubMedGoogle Scholar
  • 43 von Messling V, Harder TC, Moennig V, Rautenberg P, Nolte I, Haas L. Rapid and sensitive detection of immunoglobulin M (IgM) and IgG antibodies against canine distemper virus by a new recombinant nucleocapsid protein-based enzyme-linked immunosorbent assay. J Clin Microbiol 1999; 37: 1049-56.
    PubMedGoogle Scholar
  • 44 Welter J, Taylor J, Tartaglia J, Paoletti E, Stephensen CB. Mucosal vaccination with recombinant poxvirus vaccines protects ferrets against symptomatic CDV infection. Vaccine 1999; 17: 308-18.
    CrossrefPubMedGoogle Scholar
  • 45 Welter J, Taylor J, Tartaglia J, Paoletti E, Stephensen CB. Vaccination against canine distemper virus infection in infant ferrets with and without maternal antibody protection, using recombinant attenuated poxvirus vaccines. J Virol 2000; 74: 6358-67.
    CrossrefPubMedGoogle Scholar
  • 46 Yoshida E, Iwatsuki K, Miyashita N, Gemma T, Kai C, Mikami T. Molecular analysis of the nucleocapsid protein of recent isolates of canine distemper virus in Japan. Vet Microbiol 1998; 59: 237-44.
    CrossrefPubMedGoogle Scholar
  • 47 Yoshida E, Shin YS, Iwatsuki K, Gemma T, Miyashita N, Tomonaga K, Hirayama N, Mikami T, Kai C. Epitopes and nuclear localization analyses of canine distemper virus nucleocapsid protein by expression of its deletion mutants. Vet Microbiol 1999; 66: 313-20.
    CrossrefPubMedGoogle Scholar