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Tierarztl Prax Ausg K Kleintiere Heimtiere 2006; 34(01): 55-58
DOI: 10.1055/s-0037-1622510
VÖGEL
Schattauer GmbH

Geschlechtsbestimmung beim Lachenden Hans (Dacelo gigas) mittels Polymerasekettenreaktion

Molecular sexing of Dacelo gigas by polymerase chain reaction
C. Köhler
1   Aus dem Veterinär-Physiologisch-Chemischen Institut (geschäftsführender Direktor: Prof. Dr. H. Fuhrmann), Veterinärmedizinische Fakultät der Universität Leipzig, und dem
,
A. Gemeinhardt
1   Aus dem Veterinär-Physiologisch-Chemischen Institut (geschäftsführender Direktor: Prof. Dr. H. Fuhrmann), Veterinärmedizinische Fakultät der Universität Leipzig, und dem
,
J. Thielebein
2   Institut für Tierzucht und Tierhaltung mit Tierklinik (Leiter: Prof. Dr. H. H. Swalve) der Landwirtschaftlichen Fakultät der Martin-Luther-Universität Halle-Wittenberg
,
H. Fuhrmann
1   Aus dem Veterinär-Physiologisch-Chemischen Institut (geschäftsführender Direktor: Prof. Dr. H. Fuhrmann), Veterinärmedizinische Fakultät der Universität Leipzig, und dem
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Publikationsverlauf

Publikationsdatum:
05. Januar 2018 (online)

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Zusammenfassung

Gegenstand und Ziel:

In der vorliegenden Arbeit wird erstmals eine Methode zur Geschlechtsbestimmung mittels Polymerasekettenreaktion (PCR) beim Lachenden Hans (Dacelo gigas) vorgestellt.

Material und Methoden:

Es wurden Federkiele und Blut von sieben Vögeln untersucht, wovon zwei Tiere bekannten Geschlechts als Kontrolle dienten. Die Aufbereitung der Proben erfolgte durch alkalische Extraktion mit NaOH. Daraufhin wurde der DNA-Gehalt im Überstand mittels UV-Spektroskopie gemessen und die gewonnene DNA in einer PCR nach einer Methode von Fridolfsson und Ellegren (1999) eingesetzt. Die dort beschriebenen Primer bilden die Voraussetzung für die Vervielfältigung eines für Geschlechtschromosomen spezifischen Genabschnitts, einem Teil des aviären CHD-1-Gens (Chromo-Helicase-DNA-Bindungsprotein). Basis für die Unterscheidung stellen Sequenzunterschiede zwischen dem CHD-1W-und dem CHD-1Z-Gen dar. Die für W-und Z-Chromosom unterschiedlich langen Amplifikate des CHD-1-Gens wurden gelelektrophoretisch aufgetrennt, mit Ethidiumbromid angefärbt und mittels UV-Licht sichtbar gemacht.

Ergebnisse:

Das Geschlecht aller sieben untersuchten Tiere konnte erstmals auf molekularer Ebene sicher bestimmt werden.

Schlussfolgerung und klinische Relevanz:

Mit dieser Methode besteht nun auch für den Lachenden Hans die Möglichkeit einer schonenden Geschlechtsbestimmung zum Zwecke einer erfolgreichen Zucht und artgerechten Haltung.

Summary

Objective:

This report presents the first time use of polymerase chain reaction (PCR) for gender identification of Dacelo gigas, the Australian kingfisher.

Material and methods:

We examined blood and feathers of seven birds. Two of these animals were of known sex, serving as controls. DNA extraction was performed by an alkaline lysis of the samples with NaOH. Subsequently, the supernatant was taken to measure the content of DNA by UV spectroscopy and used as a template for PCR. The presented method employs primers described by Fridolfsson and Ellegren (1999) which amplify a part of the avian CHD-1 gene (chromohelicase-DNA-binding protein) located on both sex chromosomes, but with a different intron size on theZ and W chromosome. The PCR products were separated by agarose gelelectrophoresis, stained with ethidiumbromide and visualized by transillumination.

Results:

All seven birds could be reliably sexed by this method on a molecular level.

Conclusion and clinical relevance:

This method allows non-invasive sexing of the Australian kingfisher for the purpose of successful breeding and appropriate keeping of these animals.

Schlüsselwörter

Geschlechtsbestimmung - Dacelo gigas - Polymerasekettenreaktion - CHD- 1-Gen

Key words

Molecular sexing - Dacelo gigas - polymerase chain reaction - CHD-1 gene
 

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