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DOI: 10.1055/s-2000-8020
Georg Thieme Verlag Stuttgart · New York
Zur Fertilisation kryokonservierter humaner Oozyten (Kryo-Oo) durch intrazytoplasmatische Injektion von Spermatozoen (ICSI)
Fertilisation of Cryopreserved Human Oocytes by Intracytoplasmatic Injection of SpermatozoaPublication History
Publication Date:
31 December 2000 (online)
Zusammenfassung
Fragestellung
In den letzten zwei Jahren sind einige Fallberichte publiziert worden, wonach die schlechten Fertilisations- und Schwangerschaftsraten von kryokonservierten und aufgetauten menschlichen Oozyten durch den Einsatz der intrazytoplasmatischen Spermatozoeninjektion (ICSI) verbessert werden können. Aus diesem Grunde haben wir eine Studie begonnen, die klären soll, in welchem Maße die Fertilisations- und Schwangerschaftsraten erhöhbar sind und welche Vor- und Nachteile mit dieser Technik verbunden sind.
Material und Methodik
Nach Aufklärung über den experimentellen Charakter des Vorgehens und einer schriftlichen Einverständniserklärung durch die betroffenen Ehepaare erfolgte die Aufnahme in die Studie. Die Kryokonservierung bzw. das Auftauen der Oozyten erfolgte nach Protokollen, die wir durch Modifikation gängiger Protokolle in den letzten Jahren selbst erarbeitet haben. Die technische Ausstattung stammt von der Fa. Messer-Griesheim, Krefeld (Planer Biomed MR2 KRYO 10). Die ovarielle Stimulation wurde ausschließlich nach dem langen Protokoll durchgeführt (GnRH-Agonist/FSH, recFSH, hMG).
Ergebnisse
Bis Dezember 1998 wurden von 47 Patientinnen Oozyten kryokonserviert. 16 Patientinnen konzipierten bereits nach dem Transfer im „Frischzyklus“. Von den verbliebenen Patientinnen wurden bei 26 bislang 38 Kryozyklen durchgeführt. Von 161 kryokonservierten Oozyten degenerierten 24 (14,9 %) während des Auftauvorgangs, 13,4 % degenerierten nach Durchführung der ICSI. Diese Verlustrate ist höher als diejenige bei der Kryokonservierung von Vorkernstadien (28,3 % versus 22,1 %). Nach 36 Embryotransfers konnten sieben klinische Schwangerschaften erzielt werden. Davon endete eine als Abort, zwei mit der Geburt von gesunden Zwillingen, und vier Schwangerschaften dauern momentan noch an.
Schlussfolgerung
Das Konzept von Kryo-Oo/ICSI führt zu guten Fertilisations- (47,9 %) und Schwangerschaftsraten (23,8 % pro Auftauzyklus). Kryo-Oo/ICSI ist indiziert, wenn das Einfrieren von Embryonen oder Vorkernstadien gesetzlich nicht gestattet ist oder aus ethischen Gründen abgelehnt wird. Kryo-Oo/ICSI sollte auf alle Fälle mit all denjenigen Patientinnen besprochen werden, bei denen eine Chemo- oder Radiotherapie vorgesehen ist und damit das Risiko eines Verlustes der Fertilität besteht.
Summary
Objective
Intracytoplasmatic sperm injection (ICSI) has improved fertilization and pregnancy rates in assisted reproduction programs. We studied the fertilization of cryopreserved oocytes with ICSI.
Methods
A long protocol (GnRH analogues/FSH, hMG) was generally used for ovarian stimulation. Oocytes from 57 patients were cryopreserved using modified standard freezing and thawing protocols. 16 patients became pregnant after the first treatment cycle with native oocytes so that 31 remained for ICSI with cryopreserved oocytes. 38 cycles with cryopreserved oocytes were carried out in 26 of these patients.
Results
After thawing 24 of 161 oocytes (15%) were degenerated. The degeneration rate after ICSI was a further 13%. Thus the total degeneration rate was higher than that with pronuclear stages (28% vs. 22%). 36 embryo transfers resulted in 7 clinical pregnancies. One pregnancy ended in spontaneous abortion, 2 in the delivery of healthy twins, and 4 are ongoing.
Conclusion
Fertilization of cryopreserved oocytes by ICSI is associated with a good fertilization rate (48%) and a good pregnancy rate (24% per thawing cycle). The procedure is indicated if freezing of embryos or pronuclear stages is not an option. Furthermore, it appears to be a potential alternative for young patients scheduled for chemotherapy or radiation therapy.
Literatur
- 1 Aigner S, van der Elst J, Siebzehnrübl E, Wildt I, Lang N, van Steirteghem A C. The influence of slow and ultra-rapid freezing on the organization of the meiotic spindle in the mouse oocyte. Hum Reprod. 1992; 7 857-864
- 2 Al-Hasani S, Diedrich K, van der Ven H. Cryopreservation of human oocytes. Hum Reprod. 1987; 2 695-700
- 3 Al-Hasani S, Ludwig M. Cryopreservation of oocytes in the pronuclear stage. Gynäkologe. 1996; 29 474-486
- 4 Baka S G, Toth T L, Veeck L L, Jones H W, Muashel S J, Lanzendorf S E. Evaluation of the spindle apparatus of in-vitro matured human oocytes following cryopreservation. Hum Reprod. 1995; 10 1816-1820
- 5 Bernard A, Fuller B J. Cryopreservation of human oocytes: A review of current problems and perspectives. Hum Reprod Update. 1996; 2 193-207
- 6 Borini A, Bafaro M G, Bonu M A, Di Stratis, Sereni E, Sciajno R, Serrao L. Pregnancies after oocyte freezing and thawing. Preliminary data. Hum Reprod. 1998; 13 (Abstract book 1) 124-125
- 7 Chen C. Pregnancy after human oocyte cryopreservation. Lancet. 1986; I 884-886
- 8 Diedrich K, Felberbaum R, Baumann P. Assistierte Reproduktion - Ein Überblick. Gynäkologe. 1996; 29 413
- 9 Fabbri R, Porcu E, Marsella T, Primavera M R, Seracchioli R, Ciotti P M, Magrini O, Venturoli S, Flamigni C. Oocyte cryopreservation. Hum Reprod. 1998; 13 98-108
- 10 Gook D A, Osborn S M, Johnston W IH. Cryopreservation of mouse and human oocytes using 1, 2 propandiol and the configuration of the meiotic spindle. Hum Reprod. 1993; 8 1101-1109
- 11 Gook D, Osborn S, Bourne H, Johnston W. Fertilization of human oocytes following cryopreservation; normal karyotypes and absence of strax chromosomes. Hum Reprod. 1994; 9 684-691
- 12 Gook D A, Schiewe M C, Osborn S M, Asch R H, Jansen R PS, Johnston W IH. Intracytoplasmic sperm injection and embryo development of human oocytes cryopreserved using 1, 2 propandiol. Hum Reprod. 1995; 10 2637-2641
- 13 Gelety T, Surrey E. Cryopreservation of embryos and oocytes: An update. Curr Opin Obstet Gynecol. 1993; 5 606-614
- 14 Ludwig M, Küpker W, Al Hasani S, Diedrich K. Die intrazytoplasmatische Spermatozoeninjektion (ICSI) - Ein Überblick über die aktuelle Situation. Der Frauenarzt. 1996; 11 1624
-
15 Ludwig M, Al Hasani S, Küpker W, Diedrich K.
Kryokonservierung menschlicher Oozyten im Pronukleusstadium: Prinzipien und Ergebnisse. Diedrich K . Weibliche Sterilität - Ursachen, Diagnostik und Therapie. Berlin, Heidelberg, New York; Springer Verlag 1998 - 16 Kazem R, Thompson I A, Srikantharajah A, Laing M A, Hamilton M PR, Tempeton A. Cryopreservation of human oocytes and fertilization by two techniques: In-vitro fertilization and intracytoplasmic sperm injection. Hum Reprod. 1995; 10 2650-2654
- 17 Mandelbaum J, Junca A M, Plachot M, Alnot M O, Salat-Baroux J, Alvarez S, Tibi C, Cohen J, Debache C, Tequier I. Cryopreservation of human embryos and oocytes. Hum Reprod. 1988; 3 117-119
- 18 Matson P L, Graefling J, Junk S M, Yovich J L, Edirisinghe W R. Cryopreservation of oocytes and embryos: Use of a mouse model in investigate effects upon zona hardness and formulate treatment strategies in an in vitro-fertilization programme. Hum Reprod. 1997; 12 1550-1553
- 19 Nawroth F, Kissing K. Pregnancy after intracytoplasmic sperm injection (ICSI) of cryopreserved human oocytes. Acta Obstet Gynecol Scand. 1998; 77 462-463
- 20 Polak de Fried E, Notrica J, Rubinstein M, Marazzi A, Gomez Gonzalez M. Pregnancy after human donor oocyte cryopreservation and thawing in association with intracytoplasmic sperm injection in a patient with ovarian failure. Fertil Steril. 1998; 69 555-557
- 21 Porcu E, Fabbri R, Seraccholi R, Ciotti P M, Magrini O, Flamigini C. Birth of a healthy female after intracytoplasmic sperm injection of cryopreserved human oocytes. Fertil Steril. 1997; 68 724-726
- 22 Porcu E, Fabbri R, Seracchioli R, Ciotti P M, Petracchi S, Savelli L, Ghi T, Flamigni C. Birth of six healthy children after intracytoplasmic sperm injection of cryopreserved human oocytes. Hum Reprod. 1998; (Abstract book 1) 124
- 23 Salha O H, Sharma V, Gosden R G. The value of oocyte and ovarian tissue banking for cancer patients. Middle East Fertil Soc J. 1998; 3/1 22-28
- 24 Siebzehnrübl E, Todorow S, Spitzer M, Neuwinger J, Wildt I, Lang N. Die Erweiterung des Konzepts der extrakorporalen Befruchtung durch Kryokonservierung imprägnierter Oozyten. Geburtsh Frauenheilk. 1993; 53 359-365
- 25 Sztein J, Sweet H, Farley J, Mobraaten I. Cryopreservation and orthotopic transplantation of mouse ovaries: New approach in gamete banking. Biol Reprod. 1998; 58/4 1071-1074
- 26 Steck T, König E, Bussen S, Sütterlin M. Prophylactic intravenous hydroxyethyle starch solution prevents moderate-severe ovarian hyperstimulation in in-vitro fertilization patients: a prospective, randomized, double-blind and placebo-controlled study. Hum Reprod. 1998; 13 2421-2424
- 27 Trounson A O, Kirby C. Problems in cryopreservation of unfertilized eggs by slow cooling in dimethyl sulfoxide. Fertil Steril. 1989; 52 778-786
- 28 Tucker M J, Morton P C, Wright G. et al . Clinical application of human egg cryopreservation. Hum Reprod. 1998; 13 3156-3159
- 29 Tucker M, Wright G, Morton P, Shanguo I, Massey J, Kort H. Preliminary experience with human oocyte cryopreservation using 1, 2 propandiol and sucrose. Hum Reprod. 1996; 11 1513-1515
- 30 Tucker M J, Wright G, Morton P C, Massey J B. Birth after cryopreservation of immature oocytes with subsequent in vitro maturation. Fertil Steril. 1998; 70 578-579
- 31 Van Blerkom J, Davis P. Cytogenetic, cellular and developmental consequences of cryopreservation of immature and human oocytes. Microsc Res Techn. 1994; 27 165-193
- 32 van Steirteghem A C, Nagy Z, Joris H, Lui H, Staessen C, Smitz J, Wisante A, Devroey P. High fertilization and implantation rates after intracytoplasmatic sperm injection. Hum Reprod. 1993; 8 1061-1066
- 33 van Uem J FHM, Siebzehnrübl E R, Schuh B. et al . Birth after cryopreservation of unfertilised oocytes. Lancet. 1987; I 752-753
- 34 Vincent C, Pickering S J, Johnson M H. The zona hardening effect of dimethyl sulfoxide requires the presence of an oocyte and is associated with reduction in the number of cortical granules present. J Reprod Fertil. 1990; 253-259
- 35 Würfel W, Schleyer M, Krüsmann G, von Hertwig, Fiedler K. Fertilisation von kryokonservierten und aufgetauten humanen Oozyten (Kryo-Oo) vermittels Injektion von Spermatozoen (ICSI) - Sterilitätstherapeutisches Management und Kasuistik einer Zwillingsschwangerschaft. Zentralbl Gynakol. 1999; 121 444-448
- 36 Würfel W, Schleyer M, Krüsmann G, Fiedler K. Intrazytoplasmatische Spermatozoeninjektion (ICSI) an kryokonservierten und aufgetauten Oozyten (Kryo-Oo). Arch Gynecol Obstet. 1998; 261 (Suppl 1) 164
Prof. Dr. med. Dr. med. habil. Wolfgang Würfel
Zentrum für gynäkologische Endokrinologie und Sterilitätsmedizin (IVF)
Schmiedwegerl 2 - 6
81241 München