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DOI: 10.1055/s-0031-1296966
A New Gene Encoding the Ribosome-inactivating Protein from Mistletoe Extracts
Publication History
Publication Date:
25 December 2011 (online)
Summary
Extracts from mistletoe (Viscum album L.) contain three main toxic proteins -the lectins MLI (also known as vls-cumln), MLII and MLIII. A catalytic subu-nlt of the mistletoe plant toxic lectin MLIII has been cloned and expressed In Escherichia coli cells. The structure and immunochemical properties of recombinant MLIII A-subunlt were Investigated using a panel of monoclonal antibodies against ML-toxlns. Rlbosome-lnactlvating activity of the recombinant MLIII A-subunlt was determined In a cell-free system exhibiting Inhibition of endogenous protein synthesis. The comparative analysis of nucleotide and deduced amino acid sequences of the cloned MLIII A and the native MLI A-subunlts was performed, revealing the main differences In the primary structure of these proteins. Antigenicity analysis of the MLIII A-subunlt has revealed a new epitope d179-E184 that is not present in viscumln. The role of toxic lectins with respect to the immunological properties of mistletoe extracts Is discussed.
Zusammenfassung
Ein neues Gen, das ein Rlbosomen-inaktl-vierendes Protein aus Mistelextrakten kodiert
Extrakte und Präparate der europäischen Mistel (Viscum album L.) enthalten drei toxische Proteine, die Lektine MLI (Vlscumin), MLII und MLIII. Die ka-talytlsche Untereinheit des Mistellektlns MLIII wurde Kloniert und in Escherichia coli exprlmiert. Die Struktur sowie die immunchemischen Eigenschaften der re-kombinanten MLIII A-Unterelnheit wurden mit einer Reihe monoklonaler Antikörper, die gegen die Mistellektlne MLI bzw. MLIII gerichtet sind, untersucht. Die enzymatische Aktivität der rekombi-nanten MLIII A-Unterelnheit, die zu einer Inaktivierung der Proteinsynthese auf ribosomaler Ebene führt, wurde in einem zellfreien System quantitativ bestimmt. Eine vergleichende Analyse der Nukleotide und der davon abgeleiteten Aminosäuresequenz der Konierten MLIII A- und der nativen MLI A-Untereinheit zeigt die wesentlichen Differenzen in der Primärstruktur dieser Proteine. Die Anti-genitätsanalyse der MLIII A-Untereinheit ergab ein neues Epitop D179-E184, das in Viscumin (ML I) nicht vorhanden ist. Die Rolle der toxischen Lektine bezüglich der immunologischen Wirksamkeit der Mistelextrakte wird diskutiert.