Immunstatus-Untersuchungen bei Tumorpatienten

•Einführung

Eine durchflusszytometrische Differenzierung lymphozytärer Subpopulationen des peripheren Blutes wird routinemäßig aus Gründen der Diagnostik (Immundefekte, Infektanfälligkeit, Autoimmunerkrankungen, HIV-Diagnostik und -Kontrolle, Ausschluss von Neoplasien des Immunsystems, Immunkompetenz bei Tumorerkrankungen etc.) und der Verlaufskontrolle bei immunmodulierenden Therapieverfahren (z.B. Misteltherapie, Thymuspeptide u.a.) oder bei persistierender Immundefizienz nach zytostatischer/immunsuppressiver Therapie angewandt.

Da das zelluläre und humorale Immunsystem ein komplex intergierendes Regelsystem ist, sollte vor jeglicher immunmodulierenden Therapie eine Erfassung zumindest der immunkompetenten Zellen selbstverständlich sein, denn falsch angewandte Immunmodulationen können durchaus auch zu Einschränkungen bestimmter Aspekte der Immunabwehr führen.

Anders als bei der HIV-Verlaufskontrolle mit ihren charakteristischen „Immunstatus”-Veränderungen (Reduktion CD4⁺ T-Helfer/Induktor-Lymphozyten sowie Vermehrung CD8⁺ T-Suppressor/zytotoxischer T-Zellen), gibt es bisher keine eindeutige „Krebskonstellation” im Immunstatus, vielmehr aber eine Vielzahl unterschiedlicher Reaktionsmöglichkeiten ([Tabelle 1]). Was sollte also untersucht werden?

Tabelle 1: Immunstatus-Konstellation bei Brustkrebs-Patientinnen Konstellation n ↑ CD4+ Th 4 ↑ CD4+ Th plus ↑ CD8+ CD28+ CTL 3 ↓ CD8+ CD28+ CTL 2 ↓ CD16+/CD56+ NK 1 ↓ CD16+/CD56+ NK plus ↓ CD8+ CD28+ CTL 2 ↑ CD8+ CD28- Ts 4 ↓ CD8+ CD28- Ts 1 unauffällig 3 Dargestellt ist die Anzahl von Patienten mit auffälligem Immunstatus (anteilmäßig und absolut außerhalb des jeweiligen Normbereiches). Diese sind die ersten, nicht-selektionierten 20 Brustkrebs-Patientinnen einer laufenden randomisierten und kontrollierten Studie.

Unbestritten ist, dass eine Quantifizierung und Differenzierung Tumor-infiltrierender Immunzellen bedeutsamer ist als die Quantifizierung lymphozytärer Subpopulationen im peripheren Blut, oder dass funktionelle Testungen bedeutsamer sein können als lediglich die Präsenz immunkompetenter Zellen zu attestieren. In der Tat konnten wir oft beobachten, dass auch bei leicht ansteigender Zahl der T-Helfer/Induktor-Lymphozyten und stabilem Anteil Interleukin-2-Rezeptor (CD25)-exprimierender (aktivierter) T-Zellen von Tumorpatienten dennoch eine eingeschränkte Stimulierbarkeit der T-Zellen auftreten kann ([Abb. 1]).

Abbildung 1: Repräsentative Immunzellverläufe bei zwei Tumorpatientinnen: A: #31, weiblich, 64 Jahre; Colon-Ca (T3 N1 M0 G2); Z.n. Chemotherapie; Iscador M Serie 0, darunter Lokalreaktion (3 cm); B: #68, weiblich, 51 Jahre; Mamma-Ca (T1 No Mo G1); Z.n. Bestrahlung; antihormonelle Behandlung; Iscador M Serie 0, darunter Lokalreaktion (2,5 cm). Dargestellt sind die CD4+ T-Helfer/Induktor-Lymphozyten, die CD8+ CD28- suppressorischen T-Zellen, die peripheren IL-2-Rezeptor-exprimierenden T-Zellen und ex vivo entnommene und für 72 h mit einem Mitogen (PHA) stimulierten T-Zellen. Die Patientinnen erhielten zusätzlich einen subkutan applizierten Mistelextrakt (2 ×/Woche subkutan). Hierunter traten bei der Dosiseskalation Lokalreaktionen an der Injektionsstelle auf, die mit einer vorübergehenden Einschränkung der T-Zell-Stimulierbarkeit einhergingen (Büssing, 2005 [[5]]; Büssing et al., in Vorbereitung).

Die entsprechenden In-vitro-Testungen (z.B. Lymphozyten-Proliferationstest, Phagozytose-/Burst-Test, NK-Zell-Assay etc.) können allerdings nur in Speziallabors durchgeführt werden, und sie betrachten nur einen bestimmten Aspekt einer Reaktionsmöglichkeit des Individuums. Die so getroffenen Aussagen können also nicht automatisch auf die komplexe Gesamtsituation des Organismus mit seinen vielfältigen Reaktionsmöglichkeiten übertragen werden. Ex-vivo-Messungen des peripheren Blutes wiederum erlauben einen deskriptiven Einblick in die momentane Situation des zellulären Immunsystems („Immunstatus”), also in die Möglichkeiten der Reaktionen ([Abb. 2]). In der Routine haben sich folgende Differenzierungsparameter bewährt:

Abbildung 2: Durchflusszytometrische Untersuchung verschiedener Oberflächenmoleküle auf Lymphozyten von Tumorpatienten.

→ CD3+ T-Lymphozyten / CD19+ B-Lymphozyten → CD16+/CD56+ natürliche Killer (NK) Zellen → CD3+ CD4+ T-Helfer/Induktor-Lymphozyten (→ CD4/CD8 Quotient) → CD8+ CD28+ zytotoxische T-Zellen / CD8+ CD28- suppressorische T-Zellen → CD3+ CD25+ „aktivierte” T-Zellen → CD3+ HLA-DR+ „aktivierte” T-Zellen

Da diese Spezialuntersuchungen natürlich deutlich teurer sind als ein „Kleines Blutbild”, sollte sich der anfordernde Arzt darüber im Klaren sein, wofür er diese Informationen braucht (therapeutische Konsequenzen) und ob er die so gewonnenen Daten kompetent interpretieren kann. Natürlich sind sowohl auf Seiten der Patienten als auch auf Seiten des Arztes die Erwartungen an die Ergebnisse der immunologischen Untersuchungen sehr groß, aber ein „guter Immunstatus” schützt nicht vor einem Tumorrezidiv oder Progredienz. Dennoch lassen sich bei Tumorrezidiv oder Progredienz bestimmte charakteristische Reaktionen des zellulären Immunsystems nachweisen, die sich auch „diagnostisch” nutzen lassen. Diese sollen im Folgenden dargestellt werden.

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